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              標題單克隆抗體制備1:動物的選擇與免疫

                 

              提供者:上海信然生物技術有限公司    發布時間:2012/1/9   閱讀次數:381次 >>進入該公司展臺

              目前進行雜交瘤技術的研究多選用純種BALA/C小鼠。純種BALB/C小鼠較溫順,離窩的活動范圍小,體弱,食量及排污較小,一般環境潔凈的實驗室均能飼養成活。
                
              選擇合適的免疫方案對于細胞融合雜交的成功,獲得高質量的McAb至關重要。一般在融合前兩個月左右根據確立的免疫方案開始初次免疫,免疫方案應根據抗原的特性進行設定。用于免疫的抗原大致可分為兩類:可溶性抗原和顆?乖。
              可溶性抗原免疫原性較弱,一般要加佐劑,半抗原應先制備免疫原,再加佐劑。常用佐劑有福氏完全佐劑和福氏不完全佐劑。初次免疫時,將1~50μg抗原加福氏完全佐劑進行皮下多點注射或脾內注射(一般0.8~1ml,0.2ml/點)。3周后進行第二次免疫,抗原的劑量同初次免疫,加入福氏不完全佐劑進行皮下或腹腔內注射,腹腔內注射劑量不宜超過0.5ml。3周后進行第三次免疫,劑量同初次免疫,不加佐劑,腹腔內注射后5~7天即可采血測其效價。過2~3周后需進行加強免疫,劑量以50~500μg為宜,采取腹腔內注射或靜脈內注射。3天后即可取脾融合。
                
              目前,用于可溶性抗原(特別是一些弱抗原)的免疫方案也不斷有所更新,如:可將可溶性抗原顆;蚬滔嗷,一方面增強了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗原的使用量;蛘吒淖兛乖⑷氲耐緩,基礎免疫可直接采用脾內注射。同時使用細胞因子作為佐劑,也可提高機體的免疫應答水平,增強免疫細胞對抗原的反應性。
                
              與可溶性抗原相比,顆?乖庖咝詮,不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。

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