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條坐骨神經干是由許多興奮性不同的神經纖維所組成的。保持足夠的刺激時間不變,剛好能引起其中興奮性較高的神經纖維產生興奮,表現為受這些神經纖維支配的肌纖維發生收縮,此時的刺激強度即為這些神經纖維的閾強度,具有此強度的刺激叫閾刺激。隨著刺激強度的不斷增加,有較多的神經纖維興奮,肌肉的收縮反應也相應逐步增大,強度超過閾值的刺激叫閾上刺激。當閾上刺激在增大到某值時神經中所有纖維均產生興奮,此時肌肉做大的收縮。在繼續增強刺激強度,肌肉收縮反應不再繼續增大。將引起肌肉大收縮的小刺激強度的刺激稱為大刺激。不同頻率的電脈沖刺激神經時,肌肉會產生不同的收縮反應。若刺激頻率較低,每次刺激的時間間隔超過肌肉單次收縮的持續時間,則肌肉的反映應表現為連串的單收縮;若刺激頻率逐漸增加,刺激間隔逐漸縮短,肌肉收縮的反應可以融合,開始表現為不完全強直收縮,以后成為完全強直收縮。
【實驗對象】
蟾蜍。
【實驗器材】
蛙類解剖手術器材、蛙釘、林格液、鐵支架、活動雙凹夾或微調固定器、張力換能器、培養皿、ZL-620I醫學信號(人體生理)實驗系統。
【方法和步驟】
1. 制備在體或離體坐骨神經腓腸肌標本。
2. 實驗裝置
(1)采用離體坐骨神經腓腸肌標本時,將肌動器固定在鐵架臺的微調固定器上,且與換能器平行,并把標本中預留的股骨固定在肌動器上
(2)將張力換能器(50g量程)用活動雙凹夾或微調固定器固定在支架上,換能器與桌面平行,腓腸肌的跟腱結扎線固定在張力換能器的簧片上,結扎線與桌面垂直。調節微調固定器的上下轉鈕,使連線不宜太緊或太松,保持有定的負荷。
(3)把坐骨神經放在刺激保護電上,保持神經與刺激電接觸良好。ZL-620I醫學信號(人體生理)實驗系統的刺激輸出連接保護電,啟動ZL-620I醫學信號(人體生理)實驗系統。
3. 實驗觀察
(1)不同刺激強度對腓腸肌收縮的影響
1)點擊ZL-620I菜單“實驗/常用生理學實驗”,選擇“刺激強度對骨骼肌收縮的影響”,設置放大器、采樣和刺激器參數(表2-2-1),刺激模式也可采用單刺激或主周期刺激,逐步改變刺激幅度。
表2-2-1 ZL-620放大器、采樣和刺激器參數表
采樣參數 | 刺激器參數 | |||
顯示方式 | 記錄儀 | 刺激模式 | 自動幅度調節 | |
采樣間隔 | 1ms | 主周期 | 2s | |
X軸顯示壓縮比 | 50:1 | 波寬 | 2ms | |
通道 | 通道1 | 通道4 | 初幅度 | 0.2V |
DC/AC | DC | 記錄刺激標記 | 增量 | 0.05V |
處理名稱 | 張力 | 刺激標記 | 末幅度 | 2V |
放大倍數 | 50~100 | 5~50 | 脈沖數 | 1 |
Y軸壓縮比 | 4:1 | 64:1 | 延時 | 1ms |
2)逐漸增大刺激強度,找出剛能引起肌肉出現微小收縮的刺激強度(閾強度)。繼續增強刺激強度,觀察肌肉收縮反應是否也相應增大。繼續增強刺激強度,直至肌肉收縮曲線不能繼續升高為止。找出剛能引起肌肉出現大收縮的小刺激強度,即大刺激強度。
(2)不同頻率對腓腸肌收縮的影響
1)點擊ZL-620I菜單“實驗/常用生理學實驗”,選擇“刺激頻率對骨骼肌收縮的影響”,設置參數(表2-2-2),刺激模式可采用串刺激。
表2-2-2 ZL-620放大器、采樣和刺激器參數表
采樣參數 | 刺激器參數 | |||
顯示方式 | 記錄儀 | 刺激模式 | 自動幅度調節 | |
采樣間隔 | 1ms | 串長 | 2s | |
X軸顯示壓縮比 | 20:1 | 波寬 | 2ms | |
通道 | 通道1 | 通道4 | 幅度 | 大刺激強度 |
DC/AC | DC | 記錄刺激標記 | 頻率 | 1Hz |
處理名稱 | 張力 | 刺激標記 | 增量 | 5Hz |
放大倍數 | 50~100 | 5~50 | 末頻率 | 50Hz |
Y軸壓縮比 | 4:1 | 64:1 | 串間隔 | 5d |
2)選用大刺激強度刺激,使刺激頻率按1、6、11、16、21、26、31 Hz逐漸增加,分別記錄不同頻率時的肌肉收縮曲線,觀察不同頻率刺激時的肌肉收縮變化,從而引導出單收縮、不完全強直收縮和完全強直收縮。
【實驗結果】
骨骼肌收縮包括收縮和舒張兩個時期,測量值主要有:峰值(大值)、張力增量(發展張力)、收縮新時期和舒張1/2間期。
1. 統計全班各組的結果,以平均值±標準差表示,繪制不同刺激強度與腓腸肌收縮張力增量的關系曲線。
2. 統計全班各組的結果,以平均值±標準差表示,繪制不同刺激頻率與腓腸肌收縮張力增量(大時)的關系曲線。
3. 將觀察到的結果打印輸出或描畫于實驗報告上。
【注意事項】
1. 在制備離體神經肌肉標本及實驗操作過程中,要不斷滴加林格液,以防標本干燥而喪失正常生理活性。
2. 操作過程中應避免強力牽拉和手捏神經或夾傷神經、肌肉。
3. 每次刺激之后必須讓肌肉有定的休息時間,特別是在觀察刺激頻率的影響時。
4. 找準大刺激強度,不能刺激過強而損傷神經。
5. 實驗過程中保持換能器與標本連線的張力不變。
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