標題人P-選擇素（P-selectin）ELISA試劑盒說明書

用途：
本試劑盒用于定量測定人血清或血漿中的P-selectin濃度。

試劑盒組成：
酶標板（Coated Wells） 96wells Anti-P-selectin Biotin 22ml
樣品稀釋液 25ml 標準品（Standards） 1 set
TMB顯色液 11ml HRP 22ml
終止液（Stop Solution） 10ml 濃縮洗滌液（20x） 25ml
標準品已經稀釋10倍

需要但未提供的材料
1. 可在450nm處進行讀數的酶標2. 儀；
3. 能精確吸取10 和200µL的移液器；
4. 可調多道（8）移液器（50－5. 200µL）；
6. 供可調多道移液器使用的試劑存放槽；
7. 洗瓶或洗板機；
8. 蒸餾水或去離子水；
9. 1升的圓柱形量筒；
10. 血清移液器：1和（10或25 mL）；
11. 移液器槍頭；
12. 紙巾；
13. 計時器，14. 用以監控溫育步驟；
15. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）；

注意事項:
嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入HRP或底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
在儲存和溫育時避免強光直接照射。
平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
不能使用過期產品。
如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

樣品：
在此檢測中，可使用人血清或血漿樣品。

準備工作：
樣品稀釋10倍（10ul血清或血漿加90ul樣品稀釋液）,標準品不稀釋。
濃縮洗滌液（20X）用雙蒸水稀釋成1X（至500ml）。

操作步驟：
試劑盒應平衡至室溫（20-25°C ）再試驗。
取出所需反應板。
分別加入5ul標準品（Standards）、5ul已稀釋血清或血漿于反應板孔中，輕輕混勻10秒。
每孔加入200ul Biotin anti P-selectin，輕輕混勻30秒。37°C溫育30分鐘。
洗板：甩盡板內液體，用洗滌液洗滌反應板，并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；這樣反復洗滌5次。
每孔加入200ul HRP,輕輕混勻10秒。37°C溫育30分鐘。
洗板：甩盡板內液體，用洗滌液洗滌反應板，并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；這樣反復洗滌5次。
每孔加入100ul TMB顯色液，輕輕混勻10秒鐘，置暗處室溫溫育20分鐘。
每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；15分鐘內在450nm處讀OD值。

以OD值為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線。根據血清或血漿樣品的OD值可在標準曲線上查出其濃度。（曲線適用：y=ax2+bx+c）
標本的濃度 = 標準曲線上查出的濃度
檢測范圍：
1.56 ng/mL -100 ng/mL
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．有效期：6個月
3．濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正�，F象，不會對實驗結果造成任何影響。
5．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。