標題不同生長期施肥的柴胡中重金屬含量的原子吸收光譜法測定

　【摘要】目的考察栽培柴胡藥材的重金屬含量情況。方法收集不同生長期施肥的柴胡,以原子吸收光譜法測定樣品中的鉛、鎘、砷、汞和銅的含量。結果所有樣品的鉛、鎘、砷、汞、銅的含量均未超出限量范圍。結論該法快速、可靠，為柴胡重金屬元素的測定提供了一種簡便方法。
　　
　　【關鍵詞】柴胡;重金屬;原子吸收光譜
　　
　　柴胡為傘形科植物柴胡BupleurumchineseDC.的干燥根，是臨床及制劑常用中藥,具有和解表里、疏肝、升陽之功效，用于感冒發熱,寒熱往來等癥[1～3]。由于野生資源的匱乏，目前柴胡已大量引種栽植。本文收集了不同生長期施肥的23批柴胡,以原子吸收光譜法測定鉛、鎘、砷、汞、銅的含量,為柴胡藥材的重金屬控制提供參考依據，以期更好地控制柴胡質量。
　　
　　1材料
　　
　　1.1儀器與試劑AAnalyst800原子吸收光譜儀（美國PerkinElmer公司）;Mars-5微波消解系統（美國CEM公司）;METTLERAE240電子分析天平（德國梅特勒公司）;Milli-Q超純水發生器（美國密理博公司）;鉛、鎘、銅空心陰極燈，砷，汞無極放電燈;1000μg·ml-1的鉛（Pb）、鎘（Cd）、砷（As）、汞（Hg）、銅（Cu）標準液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心,批號分別為:GSB04-1742-2004,GSB04-1721-2004,GSB04-1714-2004,GSB04-1729-2004，GSB04-1725-2004）;氫氧化鈉、*（優級純）、30%過氧化氫（分析純）;硼氫化鈉（光譜純）;*鎳、氯化鈀、*鎂、磷酸二氫銨。
　　
　　1.2樣品種類m1,m2,m4,m5,m6,m7,mk,b1,b2,b3,b4,b5,b6,b7,bk,s1,s2,s3,s4,s5,s6,s7,sk〔苗期用m表示;拔節期用b表示;三期（苗期、拔節期、花期）同施用s表示;1，2，3...分別代表施肥種類：N、P、K、NP、NK、PK、NPK;k為空白對照〕。實驗所用柴胡樣品采自于河南省洛陽市嵩縣順勢藥業柴胡種植基地，以上樣品經河南中醫學院藥學院董誠明教授鑒定為柴胡BupleurumChineseDC.的干燥根。
　　
　　2方法與結果
　　
　　2.1鉛、鎘、砷、汞、銅樣品溶液制備精密稱取過40目篩的柴胡粉末0.3g,置于消解罐中,加入6ml*和1ml30%過氧化氫,封蓋后放入微波消解系統,同時做兩份空白。選擇3步梯度升溫方式消解,5min內由室溫升至120℃,保持1min;3min內升至150℃,保持3min;4min內升至180℃,保持25min,然后逐漸冷卻到室溫，取出消解罐，冷卻后轉移至燒杯中，在電熱板上趕酸至近干，用超純水溶解并定容至50ml，搖勻，作為試樣溶液。
　　
　　2.2對照品溶液的制備
　　
　　2.2.1鉛、砷、鎘對照品溶液的配制精密量取Pb、As、Cd標準液（1000μg·ml-1）0.1ml分別置于100ml量瓶中,用0.5%HNO3溶液稀釋至刻度。精密量取上述Pb、As溶液5ml、Cd溶液1ml分別置于100ml量瓶中,用0.5%HNO3溶液稀釋至刻度，得50μg·L-1Pb、As對照品液和10μg·L-1Cd對照溶液。
　　
　　2.2.2汞對照品溶液的配制精密量取Hg標準液（1000μg·ml-1）0.1ml于100ml量瓶中,用0.5%HNO3溶液稀釋至刻度。精密量取上述溶液0.5，1，1.5ml于100ml量瓶中，用0.5%HNO3溶液稀釋至刻度，即得濃度分別為5,10,15μg·L-1的對照品溶液。
　　
　　2.2.3銅對照品溶液的配制精密量取Cu標準液（1000μg·ml-1）0.05,0.1,0.2ml于100ml量瓶中,用0.5%HNO3溶液稀釋至刻度，即得濃度分別為0.5,1,2μg·ml-1的對照品溶液。
　　
　　2.3儀器工作參數的設定Pb、Cd、As采用石墨爐原子吸收法（GFAAS）測定，Hg用冷吸收法（HGAAS）測定，Cu用火焰原子吸收法（FAAS）測定，不同金屬離子設定儀器的工作參數,具體見表1～3。表1GFAAS儀器工作參數表表2HGAAS儀器工作參數表表3FAAS儀器工作參數表
　　
　　2.4精密度實驗分別取Pb，Cd，As，Hg，Cu元素的標準液，按“2.3”項下的方法，連續測定5次，以吸收度計算RSD分別為0.65%，0.86%，1.05%，0.97%，1.12%，表明儀器精密度良好。
　　
　　2.5線性范圍實驗分別移取一定量的標準溶液，在給定的光譜條件下，測定吸收度，以標準溶液濃度橫坐標，吸收度為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程。見表4。表4各元素回歸方程及相關系數
　　
　　2.6重復性實驗取同一批柴胡樣品6份，每份約0.3g，精密稱定，按“2.1”項下的方法制備供試品溶液，測定含量的Pb，Cd，As，Hg，Cu的RSD為：1.0%，1.2%，0.9%，1.4%，1.3%。表明該方法可行，重復性好。
　　
　　2.7加樣回收率實驗
　　
　　在已知含量的柴胡樣品（取0.15g，精密稱定）中加入一定量的Pb，Cd，As，Hg，Cu標準溶液,測定其回收率，回收率實驗結果見表5。表5回收率實驗結果
　　
　　2.8含量測定不同施肥方法柴胡重金屬含量檢測結果見表6。表6柴胡重金屬含量測定結果
　　
　　3討論
　　
　　隨著中藥現代化的發展，人們越來越重視重金屬含量對中藥質量的影響，歐美等國多次修訂了重金屬限量標準[4]。2005年版《中國藥典》收錄了AAS、ICP-MS等先進手段檢測重金屬的方法,對丹參、黃芪等6味藥材規定了Pb,Cd,Cu,As,Hg等5種重金屬元素的限量。柴胡用藥歷史悠久，為臨床和制劑常用中藥，因此有必要對柴胡重金屬進行含量測定，保證中藥材質量安全。
　　
　　3.1基體改進劑的影響Cd、As、Pb是低溫元素，灰化溫度過高易損失;灰化溫度過低，基體灰化不盡，造成在石墨爐內產生分析元素原子與基體成分的時間重疊，背景吸收較大而干擾測定[5]。本實驗參考相關文獻資料和儀器的推薦條件，用*鎂和磷酸二氫銨作為Cd和Pb的基體改進劑可使灰化溫度分別提高到500℃和850℃，使用*鎳為As的基體改進劑可使灰化溫度提高到1200℃，并有效提高原子化溫度，避免了背景吸收干擾，測定結果通過回收率的驗證。
　　
　　3.2硼氫化鈉濃度的影響冷吸收法測定汞含量的反應中，硼氫化鈉的濃度是影響氫化物反應的主要因素之一。硼氫化鈉的濃度過高，劇烈反應產生大量氫氣對汞原子有稀釋作用，測定的靈敏度降低;硼氫化鈉的濃度過低，反應不完全，亦會使測定靈敏度降低。參考相關文獻資料并經過實驗摸索，發現硼氫化鈉濃度為3%時，汞的靈敏度最高。
　　
　　對23批不同生長期施肥方法的柴胡進行重金屬含量檢測，并參照《藥用植物及制劑進出口行業綠色標準》中的重金屬元素的限量標準：Pb≤5μg·g-1,Cd≤300ng·g-1,As≤2μg·g-1,Hg≤200ng·g-1,Cu≤20μg·g-1，結果可知，所有柴胡樣品的Pb、Cd、As、Hg、Cu含量均在標準范圍內。
　　
　　柴胡空白樣品（mk、bk、sk）的重金屬含量和其他施肥樣品重金屬含量無明顯差異，主要與當地環境、氣候等有關，重金屬含量和不同生長期施N、P、K肥無特定聯系。