標題VEB-3型與VEB-1型超廣譜β-內酰胺酶生化特性

 目的  研究VEB-3型超廣譜β-內酰胺酶（ESBL）的生化特性，并與VEB-1型ESBL進行比較。方法  將blaVEB-3和blaVEB-1基因連接至pET28a載體上，并用重組質粒轉化大腸埃希菌BL21進行克隆表達，分別挑選blaVEB-3或blaVEB-1陽性表達的菌落測定β-內酰胺類抗生素對其最低抑菌濃度（MIC），同時提取酶蛋白進行等電點和酶動力學分析。 結果   VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等電點（pI 7.45），但兩者的酶動力學性質存在一定的差異：對頭孢他啶和頭孢噻肟，VEB-3較VEB-1表現出更高的親和力，兩者Km相差一倍左右；對頭孢噻吩，VEB-1比VEB-3更具親和力；而對阿莫西林，VEB-1型ESBL表現出很高的親和力，而VEB-3僅有低的親和力，兩者Km相差20多倍。 結論  VEB-3和VEB-1型ESBL具有相同的等電點，不同的動力學參數，blaVEB-1基因中Leu56 →Phe突變可能導致了兩者酶動力學性質的差異