標題High Pure 組織RNA提取試劑盒

高純核糖核酸組織試劑盒是為從組織樣品中純化完整的、不含任何污染性的脫氧核糖核酸的總核糖核酸而設計的。低至中等產量的核糖核酸分離。在離液鹽（鹽酸胍）存在下，核酸可與玻璃羊毛狀物的表面結合。這使得高純過濾管能夠特異性地固定核酸（DNA和RNA），同時不含污染物。對于RNA分離，結合條件可以優化，以確保所有RNA的固定化。高純度RNA分離試劑盒可以從廣泛的研究樣本材料中快速分離完整的總RNA，包括培養細胞、哺乳動物血液、白細胞(WBC)、酵母和細菌。它能迅速從哺乳動物組織中分離出總RNA，如老鼠的肝臟、脾臟、肺和心臟。
容量：高純旋轉過濾管可容納700 μL樣本量。
樣品材料：固體組織（如小鼠肝、脾、肺、心臟）：1 - 25 mg。

注：樣品大小取決于制備組織的方法；較大樣品(>10 mg)應通過轉子-定子均質化處理。

高純度RNA組織試劑盒已用于：

• 從人體細胞中提取總RNA，用于cDNA文庫的生成[1]
• 從培養細胞中提取總RNA用于實時PCR分析[2]
• 提取大鼠海馬狀突起總RNA[3]
• 從培養細胞和人類脊髓中純化總RNA[4]
• 從心室壁收集的組織中分離總RNA[5]

分離出來的RNA可用于許多下游應用：

• Northern印跡法
• RACE
• 引物延伸
• 差異顯示
• RNase保護測定
• 體外翻譯

在失活RNases的離液鹽（鹽酸胍）存在下，組織樣本被破壞和均勻化。然后將勻漿加載到高純旋轉過濾管中的玻璃纖維羊毛狀物上。在該方法使用的緩沖條件下，所有核酸均與高純管中的玻璃纖維羊毛狀物結合，而污染物（鹽、蛋白質和其他污染物）則不會結合。制劑中的DNA被DNase I直接在過濾器上消化。簡單的洗滌和旋轉步驟就能很容易地去除被消化的段和其他細胞污染物。剩余的純化RNA在少量的低鹽緩沖液中洗脫。

高純技術和二氧化硅吸附試劑盒
僅用于生命科學研究。不用于診斷操作。

圖1：不同均質化程序的比較。使用各種程序均質化小鼠肝臟。用高純核糖核酸組織試劑盒從每種勻漿中純化總核糖核酸。分離的核糖核酸的等分試樣用特異性針對谷氨酸脫羧酶基因區域的引物進行反向轉錄。通過凝膠電泳分析cDNA產物。

泳道1：均質化：Ultra Turrax；產量：1.9 & # 956；g/mg組織；A 260/ A 280 ： 2.0
泳道2：均質化：電動一次性塑料杵；產量：3 & # 956；g/mg組織；A 260 /A 280 ： 2.0
泳道3：均質化：研缽和杵，20 G針頭；產量：1.5 & # 956；g/mg組織；A 260 /A 280 ： 2.0
泳道4：均質化：手動一次性塑料杵，20 G針頭；產量：1.8 & # 956；g/mg組織；A 260 /A 280 ： 2.0
泳道5：均質化：手動一次性塑料杵；產量：3.4 & # 956；g/mg組織；A 260 /A 280 ： 2.0
泳道6：均質化：小珠渦旋；產量：3 & # 956；g/mg組織；A 260 /A 280 ： 2.0
泳道7：分子量標記