
您的位置:首頁 > 技術文獻 > 產品說明 > 綿羊多聚免疫球蛋白受體(PIGR/SC)ELISA試劑盒
一、制備原理
ELISA(酶聯免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結合的免疫檢測技術。綿羊PIGR/SC ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法,通過包被在微孔板上的特異性抗體捕獲待測樣本中的PIGR/SC蛋白,再加入酶標記的二抗,經過孵育和洗滌后,加入底物顯色,通過測量OD值(光密度值)來計算PIGR/SC蛋白的濃度。
二、操作步驟
1. 準備工作:將試劑盒從冰箱中取出,室溫平衡30分鐘;準備所需的試劑、樣本和標準品;按照說明書要求稀釋標準品和樣本。
2. 加樣:將稀釋后的標準品和樣本分別加入微孔板中,每孔100μL,同時設置空白對照孔,然后輕輕震蕩微孔板使液體混合均勻。
3. 孵育:將微孔板置于37℃恒溫箱中孵育1小時,使抗原與包被抗體充分結合。
4. 洗滌:取出微孔板,棄去孔內液體,加入洗滌液,震蕩洗滌5次,每次約30。
5. 加酶:向每孔中加入酶標記的二抗100μL,然后輕輕震蕩使液體混合均勻。
6. 再孵育:將微孔板再次置于37℃恒溫箱中孵育30分鐘。
7. 再洗滌:同步驟4,再次洗滌微孔板。
8. 顯色:向每孔中加入底物溶液100μL,然后置于37℃恒溫箱中避光顯色15分鐘。
9. 終止:向每孔中加入終止液50μL,終止顯色反應。
10. 測定:使用酶標儀在450nm波長下測定各孔的OD值。
三、性能評估
1. 靈敏度:通過測定不同濃度的標準品,繪制標準曲線,計算試劑盒的靈敏度。一般來說,靈敏度越高,檢測下限越低,對于低濃度樣本的檢測效果越好。
2. 特異性:通過檢測含有其他相關蛋白的樣本,評估試劑盒的特異性。特異性越高,誤檢率越低,結果越可靠。
3. 重復性:通過多次測定同一濃度的標準品或樣本,評估試劑盒的重復性。重復性越好,結果越穩定,可信度越高。
4. 穩定性:通過保存和反復使用試劑盒,評估其穩定性。穩定性好的試劑盒可以在較長時間內保持性能不變,降低使用成本。
四、應用景
綿羊PIGR/SC ELISA試劑盒的開發為綿羊免疫應答機制的研究和疾病的診斷提供了有力的工具。通過檢測綿羊PIGR/SC的表達水平,可以了解綿羊在不同生理狀態和疾病狀態下的免疫應答情況,為疾病的預防、診斷和治療提供科學依據。此外,該試劑盒還可以用于綿羊相關生物制品的質量控制和效果評價等域,具有廣闊的應用景。
總之,綿羊PIGR/SC ELISA試劑盒的制備和應用對于推動綿羊免疫學和疾病診斷域的發展具有重要意義。隨著技術的不斷和應用的不斷拓展,相信該試劑盒將在未來的科研和臨床診斷中發揮更大的作用。
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