兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA試劑盒 29

酶聯吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學技術，常用于醫學、生物域中的抗原或檢測。其操作步驟如下：1.包被：將抗原或與酶結合，形成酶標抗原或，并固定在固相載體上。2.洗滌：去除未結合的和雜質。3.封閉：加入封閉液，封閉固相載體上未結合的位點，以非特結合。4.洗滌：去除未結合的封閉液和雜質。5.加樣：加入待檢測的樣本，使其與固相載體上的抗原或結合。6.洗滌：去除未結合的樣本和雜質。7.加入酶標：使固相載體上的抗原或與酶標結合，將抗原或間接標記上酶。8.洗滌：去除未結合的酶標和雜質。9.顯色：加入底物，使酶催化底物生成有色產物，根據顏色反應的程度進行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是，具體的操作步驟可能因實驗設計、試劑品牌等不同而有所差異。在進行ELISA實驗時，應嚴格按照試劑盒說明書和實驗指導手冊進行操作，控制好實驗條件和操作步驟，以實驗結果的準確性和可靠性。

試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結合，因此試驗的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易，適合于大規模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

酶聯吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學技術，常用于醫學、生物域中的抗原或檢測。其作用包括：1.診斷：ELISA可以用于檢測或組織樣本中的特定分子，如抗原、抗原、標志物等，協助進行診斷。2.檢測：ELISA可以用于檢測血液中的，如乙型表面、人類缺陷等，用于流行病學調查和臨床診斷。3.評估：ELISA可以用于檢測后的以及劑量對的化學反應等，幫助對患者進行個性化。4.生物分子檢測：ELISA可以用于檢測生物分子，如蛋白質、多肽、等，在生物醫學研究域廣泛應用�？傊�，酶聯吸附法在醫學、生物域中具有廣泛的應用價值，是臨床診斷和中重要的輔助手段。

兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA試劑盒 29

酶聯吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或與酶的結合，形成酶標抗原或，保持其活性，同時又保留酶的活性。將抗原或與酶連接成酶標記抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在測定時，把受檢標本(含待測或抗原)和酶標抗原或按一定程序與結合在固相載體表面的抗原或起反應形成固相化抗原-酶復合物，用洗滌的使固相載體上形成的抗原-酶復合物與其它成分分離，結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的量成一定的比例，加入酶反應的底物后，底物被固相載體上的酶催化生為有色產物，通過定性或定量檢測有色產物的量即可確定樣品中待測的含量。

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質結合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數:使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

標本的采集及保存

1.：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結果分析

根據試劑盒提供的品濃度及對應的OD值，利用品繪制的曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數據處理，通過計算待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。