標題人基質金屬蛋白酶-13elisa試劑盒使用說明書

　　　　　　　　                       人基質金屬蛋白酶-13elisa試劑盒使用說明書

公司產品涵蓋ELISA研發、細胞培養，各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養基、自產實驗室耗材、小型儀器等。此外（公司名稱）還代sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類知名公司的產品。

本試劑盒僅供研究使用。
人elisa試劑盒檢測范圍： 96T
　10μg/L -320μg/L

使用目的：
　　本試劑盒用于測定人細胞上清液、血漿及相關液體樣本中基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）含量。
實驗原理
　　本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）水平。用純化的人基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入基質金屬蛋白酶-13（MMP-13），再與HRP標記的基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人基質金屬蛋白酶-13（MMP-13）濃度。
人elisa試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品（640μg/L） 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人elisa試劑盒操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

公司本著服務科研，以質量求生存，以信譽求發展的精神，精益求精，力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國內科研事業單位以及高校等提供優質的產品服務，以盡一份綿薄之力！在廣大客戶的支持和全體員工的努力下，公司正在日益發展和壯大。 不管是過去還是現在和將來，公司全體員工將再接再厲，以優質的服務態度，全新的精神面貌，為廣大新老客戶，提供優質的產品和售后服務，讓我們攜手共創美好未來！