推薦:Femto ECL 特超敏發光液
中文名稱:特超敏ECL發光液
英文名稱:Super Sensitive ECL luminescence reagent
產品規格:10mL|100mL|500mL
發貨周期:1~3天
本產品應用于免疫印跡實驗,以化學發光法檢測蛋白質。其原理是以辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體直接或間接結合膜上的目的蛋白質,在洗膜后加入本試劑盒配制的ECL工作液,即可由HRP催化發出熒光。
本產品對抗原的 檢測限可達到中飛克,在Western blot實驗中,一抗(1mg/mL)儲存液可稀釋1:1,000至1:50,000倍,二抗(1mg/mL)儲存液可稀釋1:50,000至1:200,000倍。發光信號持久,結果可以通過X光膠片曝光或者其他適當熒光成像設備進行檢測。
推薦:Femto ECL 特超敏發光液
注意事項:
- 本ECL試劑盒靈敏度高,需要優化好上樣量、一抗、二抗濃度和稀釋液、印跡膜及封閉試劑,并按照蛋白表達豐度,參考推薦的抗體稀釋比例,來獲得 實驗結果。
- 如果印跡膜上條帶過亮時,建議使用膜再生液去除抗體后重新封閉孵育,
并提高一抗二抗稀釋比例。如果條帶過暗也可將二抗稀釋比例降低至1:5000至1:10,000倍,以達到 效果。 - 本試劑盒A液和B液不可以相互污染,否則會降低產品的使用效果。
- 發光強度會隨時間緩慢減弱,建議在兩小時內完成實驗。
- 孵育二抗后,洗膜緩沖液應避免使用疊氮鈉,疊氮鈉是HPR的抑制劑。
- 為了您的安全和健康,請穿戴實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟:
- 進行常規Western Blot。
- ECL工作液按照1:1的比例等體積混合適量A液和B液制備。
注:工作液 在臨近使用配制,推薦使用劑量:0.1mL工作液/cm2膜。 - 用鑷子取出洗好的膜,瀝干膜上洗膜液,將結合有蛋白的一面朝上,放置于潔凈保鮮膜上。
- 加上配好的ECL工作液,孵育時確保工作液覆蓋整張膜,室溫孵育1~2min。
- 棄去印跡膜上ECL工作液,將一張潔凈的保鮮膜平整的鋪在印跡膜上。
- 將處理好的印跡膜置于X光片盒中,在暗室中取一張膠片小心置于膜上,曝光時間取決于膜上的發光強度,曝光后立即顯影定影,或將印跡膜放置到熒光成像儀內,按儀器說明書進行檢測。

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