標題紫外可見分光光度計法測定食品中防腐劑的含量

一、實驗目的

1、進一步了解和熟悉紫外-分光光度計的原理和結構，以美析UV-1700PC為例學習紫外分光光度計的操作。

2、掌握利用紫外分光光度法測定苯甲酸和山梨酸的吸收光譜圖。

3、掌握標準曲線法測定樣品中苯甲酸和山梨酸及其鈉鹽和鉀鹽的含量。

二、實驗原理

為了防止食品在儲存、運輸過程中發生腐蝕、變質，常在食品中添加少量防腐劑。防腐劑使用的品種和用量在食品衛生標準中都有嚴格的規定，苯甲酸和山梨酸及其鈉鹽、鉀鹽是食品衛生標準允許使用的主要防腐劑之一。

苯甲酸具有芳香結構，在波長225nm和272nm處有K吸收帶和B吸收帶。根據苯甲酸（鈉）在225nm處有大吸收，測得其吸光度即可用標準曲線法求出樣品中苯甲酸的含量。山梨酸具有α,β-不飽和羰基結構，在波長255nm處有π—π*躍遷的K吸收帶，因此可根據它們的紫外吸收光譜特征可以對它們進行定性鑒定和定量測定。

由于食品中防腐劑用量很少，GB2760-2011 規定0.2-1.5g/kg，并且食品樣品中其它的成分也可能對防腐劑的測定具有干擾作用，因此一般可預先將樣品中的防腐劑與其它成分進行分離，再經過提純和濃縮進行測定。常用的分離方法包括蒸餾法和溶劑萃取法等。

本實驗采用溶劑萃取法，先用HCl溶液將樣品進行酸化，再利用乙醚將這兩種防腐劑品從樣品中萃取出來，然后將乙醚蒸發，剩下的萃取物經過堿性溶液（NaOH）溶解與處理。后對照標準物質，利用紫外分光光度計對目的成分進行檢測。

三、實驗儀器和試劑

1.紫外可見分光光度計 UV-1700PC（上海美析儀器），25px石英比色皿，50mL容量瓶。

2.HCl溶液（1:1）、NaOH溶液（40g/L）、NaCl溶液（5%）。

3.苯甲酸鈉標準溶液的配制

（1）苯甲酸鈉標準貯備液（1.000g/L）：準確稱量經過干燥的苯甲酸鈉1.000g（105℃干燥處理2h）于1000mL容量瓶中，用適量的蒸餾水溶解后定容。該貯備液可置于冰箱保存一段時間。

（2）苯甲酸鈉標準溶液（32mg/L）：準確移取苯甲酸鈉儲備液32.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸餾水稀釋定容。

（3）系列標準溶液的配制：分別準確移取苯甲酸鈉標準溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、2.00mL和2.50mL于5個10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀釋定容。得到濃度分別為1.6 mg/L、3.2 mg/L、4.8 mg/L、6.4 mg/L和8.0 mg/L的苯甲酸鈉系列標準溶液。

4.山梨酸鉀標準溶液的配制

（1）山梨酸鉀標準貯備液（1.000g/L）：準確稱量經過干燥的山梨酸鈉1.000g（105℃干燥處理2h）于1000mL容量瓶中，用適量的蒸餾水溶解后定容。該貯備液可置于冰箱保存一段時間。

（2）山梨酸鉀標準溶液（16mg/L）：準確移取山梨酸鉀儲備液16.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸餾水稀釋定容。

（3）系列標準溶液的配制：分別準確移取山梨酸鉀標準溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、2.00mL和2.50mL于5個10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀釋定容。得到濃度分別為0.8mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.2 mg/L和4.0 mg/L的山梨酸鉀系列標準溶液。

四、樣品處理

液體樣品：醬油 、食醋取5mL，飲料取10mL于125mL分液漏斗中，加入鹽酸溶液2mL進行酸化，用無水乙醚萃取三次，每次30mL，每次振搖1min。合并乙醚層于250mL分液漏斗中，用NaCl溶液洗滌2次，每次5-10mL。然后用索氏抽提器回收乙醚，用NaOH溶液溶解，定容至100mL備用 。

若用雪碧等碳酸飲料可直接移取飲料1.5ml于50mL容量瓶中，用超聲脫氣5min驅趕二氧化碳后，用NaOH稀釋定容備用。

五、實驗步驟略

六、關于我們

上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析)，是一家具有自主知識產權的高新技術企業，美析的創業理念“科技——因你改變”，并以此為企業宗旨，不斷探究、果敢創新。特別是在分析測試儀器域，不斷開發出先進的產品，使美析成為優質儀器資源的供應者。

      美析主營光譜類儀器可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計、原子熒光光度計、ICP電感耦合等離子體發射光譜儀、ICP電感耦合等離子體質譜儀，目，我們的產品已廣泛應用于有機化學、無機化學、生物化學、醫藥、環保、冶金、石油、農業等域。同時美析利用在產品機械結構、光學設計、電氣應用和軟件開發方面積累的豐富經驗，結合市場的新實際需求，近期將陸續推出一批全新的分析類儀器。 

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