標題土壤微量元素有效硼的應用方案(姜黃素比色法)

土壤微量元素有效硼的應用方案(姜黃素比色法)

引言

科學研究和生產實踐證明微量元素為有機體正常生命活動所必需,在有機體的生活中起著重要作用。土壤和植物中的微量元素都很低，并且這些微量元素在植物體中的缺乏量、適量及致毒量范圍很窄，因此微量元素的分析測定工作較常量元素要求更加嚴格。

關鍵詞  土壤 有效硼 比色

原理

土樣經沸水浸提5分鐘，浸出液中的硼用姜黃素比色法測定。姜黃素是由姜中提取的黃色色素，以酮型和稀醇型存在，姜黃素不溶于水，但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黃色，在酸性介質中與B結合成玫瑰紅色的絡合物，即玫瑰花青苷。它是兩個姜黃素分子和個B原子絡合而成，檢出B的靈敏度是所有比色測定硼的試劑中高的(摩爾吸收系數E sso=1.80×10＇)大吸收峰在550nm處。在比色測定B時應嚴格控制顯色條件，以保證玫瑰花青苷的形成。玫瑰花青苷溶液在0.0014—0.06mg/LB的濃度范圍內符合Beer定律。溶于酒精后，在室溫下1—2小時內穩定。

儀器及試劑

美析UV-1800紫外分光光度計;

石英(或其他無硼玻璃);三角瓶(250或300ml)和容量瓶(100ml, 1000ml);

回流裝置;離心機;瓷蒸發皿(7.5cm);恒溫水浴;電子天平(1/100)。

試劑

(1)95%酒精(二);(2)無水酒精(二);

(3)姜黃素—草酸溶液:稱取0.04g 姜黃素和5g草酸，溶于無水酒精(二)中，加入4.2ml6mol/LHCl,移入100ml石英容量瓶中，用酒精定容。貯存在陰涼的地方。姜黃素容易分解，好當天配制。如放在冰箱中，有效期可延長至3—4天。

(4)B標準系列溶液:稱取0.5716gH₃BO₃()溶于水，在石英容量瓶中定容成1升。此為100mg/LB標準溶液，再稀釋10倍成為10mg/LB標準貯備溶液。吸取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,用水定容至.50ml,成為0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/LB的標準系列溶液，貯存在塑料試劑瓶中。

(5)1mol/LCaCl溶液:稱取7.4gCaCl·2H2O(二)溶于100ml水中。

操作步驟

待測液制備

稱取風干土壤(通過1mm尼龍篩)10.00g于 250ml或300ml的石英三角瓶(或塑料瓶)中，加20.0ml無硼水。連接回流冷凝器后煮沸5分鐘整，立即�；�，但繼續使冷卻水流動。稍冷后取下石英三角瓶。放置片刻使之冷卻。倒入離心管中,加2滴1mol/LCaCl,溶液以加速澄清(但不要多加)，離心分離出清液(或過濾到塑料杯中)。

測定

吸取1.00ml清液，放入瓷蒸發皿中，加入4ml姜黃素溶液。在55±3℃的水浴上蒸發至干，并且繼續在水浴上烘干15分鐘除去殘存的水分。在蒸發與烘干過程中顯出紅色，加20.0ml95%酒精溶解，用干濾紙過濾到1cm光徑比色槽中，在550nm波長處比色，用酒精調節比色計的零點。假若吸收值過大，說明B濃度過高，應加95%酒精稀釋或改用580或600nm的波長比色。

工作曲線的繪制

分別吸取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/LB標準系列溶液各1ml放入瓷蒸發皿中，加4ml姜黃素溶液，按上述步驟顯色和比色。以B標準系列的濃度mg/L對應吸收值繪制工作曲線。

結果計算

有效B,mg/L=C×液土比

式中C由工作曲線查得B的mg/L數;

液土比浸提時，浸提劑毫升數/土壤克數。

關于美析

美析主營光譜類儀器：可見分光光度計、紫外可見分光光度計、原子吸收光譜儀、原子熒光光度計、ICP-AES、ICP-MS，生命科學儀器：超微量分光光度計、全自動核酸提取儀，目，我們的產品已廣泛應用于有機化學、無機化學、生物化學、醫藥、環保、冶金、石油、農業等域。同時美析利用在產品機械結構、光學設計、電氣應用和軟件開發方面積累的豐富經驗，結合市場的新實際需求，近期將陸續推出批全新的分析類儀器。