標題遠慕生物:介紹基因組DNA提取原理

   DNA是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象。所以基因組DNA提取實驗是分子生物學最基本實驗之一。今天著重介紹基因組DNA提取的原理。在接下來的時間了還會介紹動物基因組DNA的提取步驟。

  DNA、RNA和核苷酸都是極性化合物，一般都溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有機溶劑，它們的鈉鹽比游離酸易溶于水，RNA鈉鹽在水中溶解度可達40g/L。DNA在水中為10g/L，呈黏性膠體溶液。

  在酸性溶液中，DNA天然狀態的DNA 是以脫氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于細胞核中。要從細胞中提取DNA 時，先把DNP抽提出來，再把P除去，再除去細胞中的糖，RNA 及無機離子等，從中分離DNA 。 DNP和RNP在鹽溶液中的溶解度受鹽濃度的影響而不同。DNP在低濃度鹽溶液中，幾乎不溶解，如在0.14 mol/L的氯化鈉溶解度最低，僅為在水中溶解度的1%，隨著鹽濃度的增加溶解度也增加，至1mol/L氯化鈉中的溶解度很大，比純水高2倍。RNP在鹽溶液中的溶解度受鹽濃度的影響較小，在0.14mol/L氯化鈉中溶解度較大。因此，在提取時，常用此法分離這兩種核蛋白。

  苯酚/氯仿作為蛋白變性劑，同時抑制了DNase的降解作用。用苯酚處理勻漿液時，由于蛋白與DNA 聯結鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。離心分層后取出水層，多次重復操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性質，用乙醇沉淀DNA 。此法的特點是使提取的DNA保持天然狀態，真核細胞DNA的分離通常是在EDTA及SDS一類去污劑存在下， 用蛋白酶K消化細胞獲得。遠慕生物作為國內領先的生化試劑廠家現已有各種類型DNA提取試劑盒出售。歡迎咨詢選購。