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              標題怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢

                 

              提供者:上海遠慕生物科技有限公司    發布時間:2019/8/22   閱讀次數:433次 >>進入該公司展臺

              培養細胞時,
              發現細胞增殖變慢、
              形態漸漸改變,
              是血清或培養基的問題嗎?
              很有可能是你的細胞污染了~~~~~

               

              支原體污染
              細胞污染可分為細菌、霉菌、酵母菌、支原體污染,其中支原體污染發生的概率>50%。支原體(Mycoplasma) 是最小的原核生物,約0.1-0.3μm,可穿透0.22-0.45 μm 過濾膜 (BI血清經過3次0.1μm濾膜并且檢測支原體)。
              支原體污染棘手的原因之一是沒有如其他污染源“立即可辨”的現象,支原體污染侵襲細胞但是并不一定致死。如果您的細胞出現如下狀態:增殖變慢、形態變差、培養液變黃但是沒有渾濁,說明您的細胞可能正遭受支原體的摧殘!


              受支原體污染的293T              正常無污染的293T

               
              支原體檢測
              怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢,常見的檢測方法幾種:

              1.分離培養法
              將可疑樣本接種到支原體培養基中,觀察菌落生成。缺點:培養時間長,須3~5周才能判斷。

              2.DNA熒光染色法
              利用熒光染劑 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 檢測支原體污染,但若有些細胞易有熒光背景,可能會干擾結果判讀。

              3.PCR法
              利用特異性引物,經PCR反應檢測支原體DNA,靈敏且快速。
              BI EZ-PCR支原體檢測試劑盒:采用PCR法,簡化了細胞培養中支原體污染的檢測過程,可檢測出細胞培養實驗中常見的支原體污染。

              試劑盒中包含獨特的反應混合液,以及PCR中需要的所有試劑。使用者只需備有樣品,最后產物跑完膠后,如有一個270bp的片段,則代表有支原體污染,整個檢測過程耗時約4小時。

              關鍵詞:支原體檢測  支原體污染    

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