細胞株是用單細胞分離培養或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。原代培養物經首次傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養物中的細胞世系所組成。如果不能繼續傳代,或傳代次數有限, 可稱為有限細胞系(finite cell line), 如可以連續培養, 則稱為連續細胞系(continuous cell line), 培養50代以上并無限培養下去。 所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培養細胞。從培養代數來講,可培養到40-50代。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。對于人類腫瘤細胞,在體外培養半年以上,生長穩定,并連續傳代的即可稱為連續性株或系。細胞株的生物等級,由于有些細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。購買國外細胞株時需要考慮哪些因素呢 ?
一、如果通過國外細胞株在國內的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內容:
1、明確的到貨時間,這個時間需注明的是工作日,還是普通日。
2、采用什么樣的運輸方法?
3、如果屬于技術外的因素而細胞株無法培養活,供方需負什么樣的責任?
4、細胞株的詳細資料,以及細胞株的代數,其中,細胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認
5、需在合同中注明原裝進口,避免相關公司魚龍渾雜,從國外購買回一株細胞株,經過培養傳代后,同時供應給幾個人;一般國外進口的細胞株都會有原裝的凍存管,而且每一支凍存管上都會有批號,而且每次的批號都不一樣。
6、在決定購買細胞株之前,必須仔細閱讀他們的培養信息,所謂“細胞株未到,培養基先行一步”。
7、在接到細胞株后,zui好要求供應公司的人員現場參與,從而用于確認責任。
8、在培養前,請確認您的二氧化碳培養箱二氧化碳濃度的準確性,國外的細胞株建議用進口的細胞培養瓶,比如:nunc等品牌的培養瓶。
i.詢問你的代理商或者經銷商,接到細胞株后是否需要離心置換出DMSO,因為有些細胞廠家建議不要離心,他們會認為離心而導致的碎片比DMSO產生毒性的害處更大,如果可以離心,轉速不要過高,一般都在1000轉以下,此處需要注意,因為有的公司會拿這一點來拒絕索賠!
9、培養基的服務,仔細與供應商確認培養基的品牌及份量,以免供應商以些理由來推翻你索賠的理由。選擇hyclone等優質培養基品牌
k.在細胞株復蘇時,一定要先想好步驟再做,一步一步來做,避免導致操作中的污染,復蘇是一個非常重要的步驟,往往容易導致污染,然后為污染所導致的雜質而傷透腦筋。
二、在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
三、報關時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔擱時間而導致干冰揮發完細胞株死亡,甚至于被退回給發貨人。