標題細胞培養問題及解決方案

1、細胞傳代時間比以前細胞正常傳代時間長，比如以前傳代需要一天現在傳代需要1.5天或者2天；

2、細胞在傳代過程中細胞形態產生變化，比如以前細胞正常形狀是圓形的現在是梭形或者細胞變瘦；

3、細胞溶液中有小黑點。

上述原因出現有下面兩組主要原因構成：A 支原體污染   B血清營養不夠

A、支原體污染 判斷方案

同一個培養箱中的培養瓶里面的細胞  在顯微鏡下逐個觀察如果有80%的細胞有小黑點可以判斷是支原體污染；

50%一下的細胞有小黑點， 可以判斷不是支原體污染而是血清營養不夠引起的細胞有小黑點。

B、血清營養不夠判斷方案

除過上述支原體污染原因外，細胞溶液中出現小黑點的主要原因就是培養細胞的血清營養不夠；

血清營養不夠會引起細胞過渡性分泌或者細胞碎片脫落，這些脫落物是形成小黑點的主要原因。

不規范血（假血清、國內灌裝血清）清對下游實驗的影響：

因為國內自然環境影響（霧霾））加上牛吃的草中有農藥殘留，飼料中過度性的促進牛生長的添加劑，會引起牛血液中分泌對細胞生長可能有害的蛋白因子，從而引起科研者研究的目標蛋白在細胞的表達量或者趨勢不對或者不表達；這個情況經常在WB實驗中發生（研究的目標蛋白趨勢不對或者不表達）；

綜上所述建議客戶購買有國家資質的原裝進口血清，比如ZETA LIFE胎牛血清。

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