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For Research Use only
僅供研究用
貨號:QYS-232001
紫外分光光度法:50 管/48 樣
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
DHAR 存在于細胞質、線粒體和葉綠體中。DHAR 催化 GSH 還原 DHA 生成 AsA 和 GSSG,調控細胞 AsA/DHA 比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環的關鍵酶。提高植物體內的DHAR 活性,可提高植物食品中 AsA 含量,進而提高植物食品的營養品質。
測定原理:
DHAR 催化 GSH 還原 DHA 生成 AsA,通過測定 DHA 減少速率,計算 DHAR 活性。
實驗中所需儀器及設備:
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL 石英比色皿、可調式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
粗酶液提。
1. 按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測。
2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104 個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議
500 萬細胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);8000g 4℃離心 20min,取上清液置冰上混勻待測。
3.血清等液體:直接測定。
DHAR 測定操作:
DHAR 活性計算公式:
(1). 按蛋白濃度計算
(2). 按樣本質量計算
(3). 按細胞數量計算
(4)按液體體積計算
注意事項:
臨用前配制的試劑未使用完的 4℃保存,3 天內使用完。
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關鍵詞:脫氫抗壞血酸還原酶酶活
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