ELISA試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶符號的抗原或抗體既保存其免疫學活性，又保存酶的活性。ELISA試劑盒在測定時，受檢標本（測定其間的抗體或抗原）與固相載體外表的抗原或抗體起反響。
用洗刷的辦法使固相載體上構成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分隔。再參加酶符號的抗原或抗體，也經過反響而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產品，產品的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色。
使用雙抗體夾心法測定標本中人可溶性粘附分ELISA試劑盒水平。用純化的人可溶性粘附分ELISA試劑盒抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次參加可溶性粘附分ELISA試劑盒，再與HRP符號的可溶性粘附分ELISA試劑盒抗體結合，構成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過完全洗刷后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終究的黃色。色彩的深淺和樣品中的可溶性粘附分ELISA試劑盒呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），經過規范曲線核算樣品中人可溶性粘附分濃度。
