標題氣相色譜指南

                                            氣相色譜使用注意事項和應用指南

 進樣應注意問題

手不要拿注射器的針頭和有樣品部位、不要有氣泡（吸樣時要慢、快速排出再慢吸，反復幾次，

    10ul注射器 金屬針頭部分體積0.6ul，有氣泡也看不到，多吸1-2ul把注射器針尖朝上氣泡上走到頂部再推動針桿

    排除氣泡，（指10ul注射器，帶芯子注射器平感覺）進樣速度要快（但不易特快），每次進樣保持相同速度，針尖到汽化室中部開始注射樣品。

  安裝色譜柱

   1.安裝拆卸色譜柱必須在常溫下。

   2.填充柱有卡套密封和墊片密封，卡套分三種，金屬卡套，塑料卡套，石墨卡套，安裝時不易擰的太緊。墊片式密封每次按裝色譜柱都要換新的墊片（島津色譜是墊片密封）。

   3.色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好。防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測器中。

   4.毛細管色譜柱安裝插入的長度要根據儀器的說明書而定，不同的色譜汽化室結構不同，所以插進的長度也不同。

    需要說明的如果你用毛細管色譜柱采用不分流，汽化室采用填充柱接口這時與汽化室連接毛細管柱不能探進太多，

    略超出卡套即可。 氫氣和空氣的比例對FID檢測器的影響 氫氣和空氣的比例應1：10，當氫氣比例過大時FID檢測

    器的靈敏度急劇下降，在使用色譜時別的條件不變的情況下，靈敏度下降要檢查一下氫氣和空氣流速。氫氣和空氣

    有一種氣體不足點火時發出“砰”的一聲，隨后就滅火，一般當你點火電著就滅，再點還著隨后又滅是氫氣量不足。

 使用TCD檢測器

   1.氫氣做載氣時尾氣一定要排到室外。

   2.氮氣做載氣橋流不能設大，比用氫氣時要小的多。

   3.沒通載氣不能給橋流，橋流要在儀器溫度穩定后開始做樣前在給。

    如何判斷FID檢測器是否點著火不同的儀器判斷方法不同，有基流顯示的看基流大小，沒有基流顯示的用帶拋光面的扳手湊近檢測器出口，觀察其表面有無水汽凝結 。 如何判斷進樣口密封墊是否該換 進樣時感覺特別容易，用TCD檢測器不進樣時記錄儀上有規則小峰出現，說明密封墊漏氣該更換。更換密封墊不要擰的太緊，一般更換時都是在常溫，溫度升高后會更緊，密封墊擰的太緊會造成進樣困難，常常會把注射器針頭弄彎。 如何選擇合適的密封墊密封墊分一般密封墊和耐高溫密封墊，汽化室溫度超過300℃時用耐高溫密封墊，耐高溫密封墊的一面有一層膜，使用時帶膜的面朝下。

怎樣防止進樣針不彎

很多做色譜分析工作的新手常常會把注射器的針頭和注射器桿弄彎，原因是：

   1.進樣口擰的太緊，室溫下擰的太緊當汽化室溫度升高時硅膠密封墊膨脹后會更緊，這時注射器很難扎進去。

   2.位置找不好針扎在進樣口金屬部位。

   3.注射器桿彎是進樣時用力太猛，進口色譜帶一個進樣器架，用進樣器架進樣就不會把注射器桿弄彎。

   4.因為注射器內壁有污染，注射時將針桿推彎。注射器用一段時間就會發現針管內靠近頂部有一小段黑的東西，這時吸樣注射感到吃力。清洗方法將針桿拔出，注入一點水，將針桿插到有污染的位置反復推拉，一次不行再注入水直到將污染物弄掉，這時你會看到注射器內的水變的渾濁，將針桿拔出用濾紙擦一下，再用酒精洗幾次。分析的樣品為溶劑溶解的固體樣時，進完樣要及時用溶劑洗注射器。

   5.進樣時一定要穩重，急于求快會把注射器弄彎的，只要你進樣熟練了自然就快了。氣相色譜常見故障診斷 氣相色譜種類很多，性能也各有差別。主要包括兩個系統。即氣路系統和電路系統。氣路系統主要有壓力表、凈化器、穩壓閥、穩流閥、轉子流量計、六通進樣閥、進樣器、色譜柱、檢測器等；電子系統包括各用電部件的穩壓電源、溫控裝置、放大線路、自動進樣和收集裝置、數據處理機和記錄儀等電子器件。 要分析和判斷色譜儀的故障所在，就必須要熟悉氣相色譜的流程和氣、電路這兩大系統，特別是構成這兩個系統部件的結構、功能。色譜儀的故障是多種多樣的，而且某一故障產生的原因也是多方面的，必須采用部分檢查的方法，即排除法，才可能縮小故障的范圍。對于氣路系統出的故障，不外乎是各種氣體（特別是載氣）有漏氣的現象、氣體不好、氣體穩壓穩流不好等等。例如：基線若始終向下漂移，即“電平”值逐漸變小至負數，這極有可能是載氣泄漏，那么就要查找各個接頭部件是否有漏的現象，若不漏而基線仍漂移，則可能是電路系統的故障。色譜氣路上的故障，分析工作者可以找出并排除，但要排除電路上的故障則并非易事，就需要分析工作者有一定的電子線路方面的知識，并且要弄清楚主機接線圖和各系統的電原理圖（尤其是接線圖）。

     在這些圖上清楚的畫出了控制單元和被控對象間的關系，具體的標明了各接插件引線的編號和去向，按圖去檢查電路、找尋故障是非常方便的。色譜電路系統的故障，一般是溫度控制系統的故障和檢測放大系統的故障，當然不排除供給各系統的電源的故障。溫控系統（包括柱溫、檢測器溫控、進樣器溫控）的主回路由可控硅和加熱絲所組成，可控硅導通角的變化，使加熱功率變化，而使溫度變化（恒定或不恒定）。而控制可控硅導通角變化的是輔回路（或稱控溫電路），包括鉑電阻（熱敏元件）和線性集成電路等等。

由上所述可知，若是溫控系統的毛病，則應首先要檢查可控硅是否壞，加熱絲是否壞（斷或短路），鉑電阻是否壞（斷或短路）或是否接觸不良。其次檢查輔回路的其它電子部件。。放大系統常見故障是離子訊號線受潮或斷開、高阻開關（即靈敏度選擇）受潮、集成運算放大器（如：AD515JH、OP07等）性能變差或壞等等。常，則說明故障不在放大器和處理機（或記錄儀），而在氣路部分或溫度 色譜故障的排除既要做到局部又要考慮到整體，有“果”必有“因”，弄清線路的走向，逐步排除產生“果”（故障）的“因”，把故障范圍縮小。 例如：若出現基線不停的抖動或基線噪音很大時，可先將放大器的訊號輸入線斷開，觀察基線情況，如果恢復正控制單元；反之，則說明故障發生在放大器、記錄儀（或處理機）等單元上。這種部分排除的檢查故障方法，在實際中是非常有用的。 怎樣老化色譜柱 新填充的色譜柱不能馬上使用還需要進行老化處理。老化的目的有兩個，一是為了徹底除去填充物中的殘余溶劑，和某些揮發性雜質，另一個目的是促進固定液均勻的、牢固分布在單體的表面上。 老化的方法：-把柱子與汽化室連接，與檢測器一端要斷開，以氮氣為載氣，流速是正常的一半即可，溫度選擇固定液的最高使用溫度，老化時間大約20小時，老化完成后將儀器溫度降至近室溫關閉色譜儀，待儀器溫度恢復室溫再將色譜柱連接到檢測器上（老化時接汽化室的一端最好接在檢測器上），開機，在使用溫度下看基線是否平穩，如果平穩色譜柱就算老化好了，否則要繼續老化。

 幾種常用色譜柱的老化溫度

柱名稱                                   最高使用溫度，℃

角鯊烷（異三十烷）                        140

阿皮松L                                        300

PEG 20M                                     200

PEG 6000                                    175

Ucon HB 2000                             225

阿皮松K、M                                   250

SE 30                                          300

OV 1                                            300

E 301                                          300

OV 17                                          300

SE 52                                          300

DC FS-1265 （舊稱QF-1）            250

DC 703                                        250

SE 54                                          300

Porapak-Q                                   250

Porapak-T                                    200

GDX-101，102，103，104，201  270

GDX-301，401，403                    250

GDX-601                                      200

TDX-01                                        400

碳分子篩                                       400

檢測器清洗在色譜操作過程中，鑒定器有時受固定相流失及樣品中的高沸點成分、易分解及腐蝕性物質的作用而被沾污，以至不能正常進行工作，因而提出了如何清洗鑒定器的問題。若沾污的物質僅限于高沸點成分，通�？蓪㈣b定器加熱至最高使用溫度后，再通入載氣，就可清除。使用有放射源的鑒定器時加熱要多加小心，例如通常以氚源作成的電子捕獲鑒定器一般都不能超過200度，此外還應注意加熱的溫度不能損壞鑒定器的絕緣材料。 如用加熱法不適宜，也可以用純的丙酮等溶液從進樣口注入（每次可注入幾十微升）進行清洗，這在沾污程度較輕時是有效的。 若以上方法都不能解決沾污問題，應將鑒定器卸下進行較徹底的清洗，先選擇適宜溶劑，要既能溶解沾污物，又不能損壞鑒定器，用注射器注入測量池進行清洗。

若有條件，用超生波清洗就更理想些，要注意的是：清洗過的部分不能用手摸。

一、熱傳導鑒測器的清洗、 將丙酮，乙醚，十氫萘等溶劑裝滿鑒定器的測量池，浸泡一段時間（20分鐘左右）后傾出，如此反復進行多次至所傾出的溶液比較干凈為止。

當選用一種溶劑不能洗凈時，可根據沾污物的性質先選用高沸點溶劑進行浸泡清洗，然后再用低沸點溶劑反復清洗。洗凈后加熱趕去溶劑，再裝到儀器上，加熱鑒測器，通載氣沖洗數小時后即可使用。 二、氫焰離子化鑒測器的清洗 當沾污不太嚴重時，可不必卸下清洗，此時只需要將色譜柱取下，用一根管子將進樣口與鑒定器聯接起來，然后通載氣并將鑒測器爐溫升至120度以上，從進樣口先注入20微升左右的蒸餾水，再用幾十微升丙酮或氟里昂（Ｆreon113等）溶劑進行清洗。在此溫度下保持1－2小時檢查基線是否平穩，若仍不滿意可重復上述操作或卸下清洗。 當沾污比較嚴重時，必須卸下清洗。先卸下收集極，正極，噴嘴等，若噴嘴是石英材料制成的，先將其放在水中進行浸泡過夜。若噴嘴是不銹鋼等材料做成，則可與電極等一起，先小心用細砂紙（300－400＃）打磨，再用適當溶劑（浸泡如甲醇與苯1：1），也可以用超聲波清洗，最后用甲醇洗凈，放置于烘箱中烘干。注意勿用含鹵素的溶劑（如氯仿、二氯甲烷等）。以免與聚四氟乙烯材料作用，導致噪聲增加。洗凈后的各個部件，要用鑷子取，勿用手摸。

烘干后裝配時也要小心，否則會再度沾污。裝入儀器后，先通載氣30分鐘，再點火升高檢測室溫度，最好先在、120度保持數小時之后，再升至工作溫度。 三、電子捕獲鑒測器的清洗 電子捕獲鑒測器中有放射源，通常為Ｈ3或Ｎi63，因此要特別小心。

先拆開鑒定器中有放射源箔片，然后用2：1：4的硫酸、硝酸及水溶液洗鑒測器的金屬及聚四氟乙烯部分。 當清洗液已干凈時，再用蒸餾水清洗，然后用丙酮洗，再置于100度左右的烘箱中烘干。 對Ｈ3源箔片，先用己烷或戊烷淋洗，絕不能用水洗。

廢液要用大量水稀釋后棄去。 對Ｎi63源更應小心，絕不能與皮膚接觸，只能用長鑷子操作。先用乙酸乙酯加碳酸鈉淋洗或用苯淋洗，再于沸水中浸泡5分鐘，取出烘干，裝入鑒定器中。裝入儀器后通載氣30分鐘，再升至操作溫度，幾小時后備用。 清洗剩下的廢液要用大量水稀釋后才能棄去。 如何防止FID收集極上的積垢 清除收集極積垢，拆洗FID時，常把噴嘴拆斷造成了不可挽回的損失。依據FID工作原理，收集極對地為高阻，一般都在107歐姆以上，所以收集極的一般污染或收集極和靜電計連接不良，除非在限制靈敏度操作外不會造成嚴重的噪聲。 所以當操作FID遇到尖峰噪聲（基線毛刺）不提倡首先拆洗FID檢測器，而應先尋找其它引起噪聲的原因如：

1.氣流比是否合適;

2.汽化室嚴重污染;

3.柱流失嚴重（老化不夠）;

4.靜電放大器不穩定;

5.極化電壓不穩定;

6.有關信號連接接觸不良;

7.市電不穩定;

8.接地不正確;

9.數據處理機有故障或參數設置不合理;

10.氣體純度欠佳（特別是使用各種氣體發生器時）;

11.色譜柱連接以后各接頭有嚴重漏氣。只要有一定經驗，上述檢查

即簡單又直觀。 我們經�？吹綑z測器特別是收集極內沉積的白色粉末壯物質，均是硅酮型固定相流失經FID 中燃燒后生成的二氧化硅所致。

為防止二氧化硅在檢測器 中積聚要注意以下幾點：

 ①譜柱在連接檢測器使用前充分老化。

②最好應用純度較高（如色譜級純）的固定相OV-101；少用純度差的D-200。

 ③在滿足分析對FID靈敏度要求的情況下，盡量選擇大

一些的空氣流量，以便把各種燃燒物排出FID。在確認可能是FID污染引起某種脈沖尖峰干擾噪聲后。其清除積垢方法有以下三種供大家參考使用。

 ①：注射若干微升氟里昂，燃燒形成氟化氫，氟化氫和二氧化硅反應后形成可揮發性物質。

 ②：拆下檢測器的有關部分如：收集極，噴嘴，殼體，絕緣體等。在超聲波浴中清洗兩小時，用蒸餾水漂洗。裝入檢測器之前，再用丙酮清洗一次。

 ③：若相關部分特別是收集極積垢太多時，可以用細顆粒砂紙打磨清洗也是一種好方法。

色譜柱的正確安裝才能保證發揮其最佳的性能和延長使用壽命。 正確的安裝請參考以下步驟：

步驟1. 檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等檢查氣體過濾器和進樣墊，保證輔助氣和檢測器的用氣暢通有效。

如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進樣口的襯管清洗或更換。

 步驟2. 將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平

步驟3. 將色譜柱連接于進樣口上色譜柱在進樣口中插入深度根據所使用的GC儀器不同而定。

正確合適的插入能最大可能地保證試驗結果的重現性。通常來說，色譜柱的入口應保持在進樣口的中下部，

當進樣針穿過隔墊完全插入進樣口后如果針尖與色譜柱入口相差1-2cm，這就是較為理想的狀態。

（具體的插入程度和方法參見所使用GC的隨機手冊）避免用力彎曲擠壓毛細管柱，并小心不要讓標記牌等有鋒利邊緣的物品與毛細柱接觸摩擦，以防柱身斷裂受損。將色譜柱正確插入進樣口后，用手把連接螺母擰上，擰緊后（用手擰不動了）用扳手再多擰1/4-1/2圈，保證安裝的密封程度。因為不緊密的安裝，不僅會引起裝置的泄漏，而且有可能對色譜柱造成永久損壞。

 步驟4. 接通載氣當色譜柱與進樣口接好后，通載氣, 調節柱前壓以得到合適的載氣流速（見下表）。

柱前壓設置為Psi 　

15m        25m        30m        50m        100m

0.20mm          10-15        20-30       18-30      40-60        80-120

0.25mm           8-12         13-22       15-25      28-45        55-90

0.32mm           5-10         8-15         10-20      16-30        32-60

0.53mm           1-2           2-3            2-4         4-8            6-14

（以上僅為建議的起始設置，具體數值要依據實際的載氣流速）。將色譜柱的出口端插入裝有己烷的樣品瓶中，正常情況下，我們可以看見瓶中穩定持續的氣泡。如果沒有氣泡，就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否正確設置，并檢查一下整個氣路有無泄漏。等所有問題解決后，將色譜柱出口從瓶中取出，保證柱端口無溶劑殘留，再進行下一步的安裝。

步驟5. 將色譜柱連接于檢測器上其安裝和所需注意的事項與色譜柱與進樣口連接大致相同。如果在應用中系統所使用的是ECD或NPD等，那么在老化色譜柱時，應該將柱子與檢測器斷開，這樣檢測器可能會更快達到穩定。

步驟6. 確定載氣流量，再對色譜柱的安裝進行檢查注意：如果不通入載氣就對色譜柱進行加熱，會快速且永久性的損壞色譜柱。

步驟7. 色譜柱的老化色譜柱安裝和系統檢漏工作完成后，就可以對色譜柱進行老化了。對色譜柱升至一恒定溫度，通常為其溫度上限。特殊情況下，可加熱至高于最高使用溫度10-20℃左右，但是一定不能超過色譜柱的溫度上限，那樣極易損壞色譜柱。當到達老化溫度后，記錄并觀察基線。初始階段基線應持續上升，在到達老化溫度后5-10分鐘開始下降，并且會持續30-90分鐘。當到達一個固定的值后就會穩定下來。如果在2-3小時后基線仍無法穩定或在15-20分鐘后仍無明顯的下降趨勢，那么有可能系統裝置有泄漏或者污染。遇到這樣的情況，應立即將柱溫降到40℃以下，盡快的檢查系統并解決相關的問題。

如果還是繼續的老化，不僅對色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩定的基線。一般來說，涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時間長，而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同。PLOT柱的老化

步驟:HLZ Pora 系列 250℃， 8小時以上Molesieve（分子篩） 300℃ 12小時Alumina（氧化鋁） 200℃ 8小時以上由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附，使得這兩種色譜柱容易發生保留行為漂移。當柱子分離過含有高水分樣品后，需要將色譜柱重新老化，以除去固定相中吸附的水分。

 步驟8. 設置確認載氣流速對于毛細管色譜柱，載氣的種類首選高純度氮氣或氫氣。

載氣的純度最好大于99.995%，而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是毛細管色譜柱，那么依照載氣的平均線速度（cm/sec）,而不是利用載氣流量（ml/min）來對載氣做出評價。因為柱效的計算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值：

氮氣：10-12cm/sec 氫氣：20-25cm/sec載氣雜質過濾器在載氣的管線中加入氣體過濾裝置不僅可以延長色譜柱壽命，而且很大程度的降低了背景噪音。建議最好安裝一個高容量脫氧管和一個載氣凈化器。使用ECD系統時，最好能在其輔助氣路中也安裝一個脫氧管。

步驟9. 柱流失檢測在色譜柱老化過程結束后，利用程序升溫作一次空白試驗（不進樣）。

一般是以10℃/min從50℃升至最高使用溫度，達到最高使用溫度后保持10min。這樣我們就會的到一張流失圖。

這些數值可能對今后作對比試驗和實驗問題的解決有幫助。在空白試驗的色譜圖中，不應該有色譜峰出現。

如果出現了色譜峰，通�？赡苁菑倪M樣口帶來的污染物。如果在正常的使用狀態下，色譜柱的性能開始下降，基線的信號值會增高。

另外，如果在很低的溫度下，基線信號值明顯的大于初始值，那么有可能是色譜柱和　GC系統有污染。

其他：色譜柱的保存用進樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。在安裝時要將色譜柱的兩端截去一部分，保證沒有進樣墊的碎屑殘留于柱中�！∽⒁猓寒斂諝庵袣錃獾暮�量在4-10%時，就有爆炸的危險。

所以一定要保證實驗室有良好的通風系統。