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              標題古朵詳述細胞培養中的無菌技術

                 

              提供者:上海古朵生物科技有限公司    發布時間:2016/10/28   閱讀次數:958次 >>進入該公司展臺

                  詳述細胞培養中的無菌技術   上海古朵生物簡述:

                  1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株的操作。

                  2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的中央無菌區域,勿在邊緣的非無菌區域操作。

                  3.小心取用無菌的實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口,亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

                  4.工作人員應注意自身的安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心毒性,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭的傷害等。

                  5.定期檢測下列項目:

                  5.1.CO2鋼瓶的CO2壓力

                  5.2.CO2培養箱的CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,每周更換)。

                  5.3.無菌操作臺內的airflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜,預濾網(300小時/預濾網,3000小時/HEPA)。

                  6.水槽可添加消毒劑(Zephrin1:750),定期更換水槽的水。

              關鍵詞:細胞培養/培養基/科研實驗  

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