標題結腸稈菌感覺態細胞的制備

 
感覺態的細胞可以攝入外部溶液中的DNA，而常態的細胞卻不可以，所以要轉化質粒DNA進入了結腸桿菌務必首先制備感覺態的結腸桿菌細胞。

1、取0.1ml過夜培育物轉種于含10ml LB營養物質的三角學瓶中，37℃干燥箱培育3h至OD600=0.3
2、而后再在4℃下以4000rpm離心10min，去上清液
3、在4℃下以4000rpm離心5min，去上清液真空干燥箱
4、而后把培育物倒入1.5ml離心管中，冰浴10min。
5、把菌體懸浮于15m1寒冷的0.1M CaCl2溶液中，置冰上30min
6、取1百分之百結腸桿菌E.coli接種于含2ml LB營養物質的玻璃管中，37℃電熱恒溫鼓風干燥箱培育過夜
7、將菌體懸浮于0.1ml CaCl2溶液中，冰浴安放4-12hr備用。