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重疊區擴增基因拼接法,是基于普通PCR 技術衍生出的一種基因融合和定點突變的有效方法。眾所周知,由于引物只需要與模板有效結合,尤其是5’端序列不必與模板完全配對,因此擴增引物的5’端可以添加一種甚至是兩種酶切位點,以便于后期克隆。SOEing 法正是利用這一特點,向兩個獨立基因摻入一段新的序列以達到兩個基因出現一個重疊區的目的,3’端的結合使基因融合或定點突變得以實現。
RT-PCR 為反轉錄PCR或RCR(reverse transcription PCR)和實時PCR(real time PCR)共同的縮寫。逆轉錄PCR,或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA,再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。
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