標題高效液相色譜測定復方胃腸佳膠囊中丹皮酚的含量

【摘要】 　　目的建立復方胃腸佳膠囊中丹皮酚的含量測定方法。方法運用超聲提取方法對復方胃腸佳膠囊進行提取，并用高效液相色譜法進行丹皮酚的含量測定。結果丹皮酚在0.1～0.5 μg之間與峰面積呈良好的線性關系，r=0.999 9，平均加樣回收率100.14％ ，RSD為0.95％（n=5）。結論高效液相色譜法測定丹皮酚，方法靈敏，重復性好。

【關鍵詞】 復方胃腸佳膠囊 丹皮酚 超聲提取法 高效液相色譜法

　　 復方胃腸佳膠囊由徐長卿、五香血藤、吳茱萸、九月生等藥材組成，貴州省黔東南苗族地區民間常用于治療胃病，并且應用較廣泛，具有祛風活血、理氣止痛之功效，臨床上可用于治療淺表性胃炎、萎縮性胃炎、胃痛、胃潰瘍、十二指腸潰瘍等�，F代研究表明丹皮酚具有抗菌和消炎作用，為復方胃腸佳膠囊的有效成分之一。本實驗以高效液相色譜法對復方胃腸佳膠囊所含的丹皮酚進行含量測定研究。

　　1 儀器與試劑

　　儀器：Agilent-1100高效液相色譜議（二元泵，DAD檢測器）。甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。丹皮酚對照品（批號：0708－9704）由中國藥品生物制品檢定所提供。

　　2 方法與結果

　　2.1 色譜條件

　　用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；DiamonsilTM （鉆石）C18柱（250 mm×4.6 mm，迪馬公司生產）,流動相為甲醇－水（60∶40），檢測波長為274 nm［1］。

　　2.2 對照品溶液的制備

　　精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇制成每毫升含0.101 4 mg的溶液作為對照溶液，即得。

　　2.3 供試品溶液的制備

　　取樣品0.2g，精密稱定重量，加甲醇10 ml，精密稱定重量，超聲提取20 min，放冷，再稱定重量。用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液即得［2］。

　　2.4 陰性樣品溶液的制備

　　取陰性樣品（缺徐長卿）0.2 g，按供試品溶液的制備方法制備，即得。

　　分別吸取10 μl的對照品、樣品與陰性樣品溶液注入液相色譜儀測定。結果表明，在與丹皮酚對照品相應位置上無干擾峰出現，說明處方中其它藥味對測定結果無影響。見圖1。

　　2.5 線性關系的考察

　　精密稱取丹皮酚對照品適量，加甲醇制成每毫升含1.014 mg的對照溶液。再精密吸取對照品溶液1，2，3，4，5 ml分別置于10 ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，分別精密量取上述對照品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，以峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為A=5 314.49C -9.590 4，r=0.999 9。結果表明，在色譜條件下，丹皮酚在0.1～0.5 μg之間與峰面積呈良好的線性關系。

　　2.6 精密度實驗

　　精密吸取對照品溶液2 μl，注入液相色譜儀重復測定5次，RSD值為0.50%，說明儀器的精確度良好。

　　2.7 穩定性實驗

　　精密吸取供試品10 μl，注入液相色譜儀，進行穩定性考察，在每間隔2 h測定1次，共測定5次，測定數據穩定，5次的RSD值為0.24%，表明在10 h內樣品穩定。

　　2.8 重復性實驗

　　取供試樣品（批號：020402）按含量測定方法進行5次測定，測得丹皮酚百分含量平均值為0.688 mg·ml-1，RSD值為1.79%，說明本方法重復性良好。

　　2.9 回收率實驗

　　取已知含量的胃腸佳（批號：020402）5份，每份約0.15 g，精密稱定，分別精密量取丹皮酚對照品溶液（0.1014 mg·ml-1）1 ml，按制備供試品溶液方法制備，并按含量測定方法進行測定，計算回收率。結果平均回收率為100.14%，RSD值為0.95%。結果見表1。表1 回收率實驗結果（略）

　　2.10 樣品含量測定

　　按正文含量測定項方法測定本品10批樣品，并分別平行操作一份。結果見表2。表2 10批樣品中丹皮酚含量測定結果（略）

　　根據表2中10個批號樣品測定結果，本品每克含徐長卿以丹皮酚（C9H10O3）計,不得少于0.5 mg。

　　3 討論

　　曾先后考察了以下提取方法：①40%甲醇；②50%甲醇； ③60%甲醇； ④80%甲醇；⑤甲醇。分別超聲10，20，30 min。結果表明，甲醇超聲20 min測得的樣品含量最高，故選擇甲醇超聲20 min的提取方法［3］。

　　用HPLC法測定復方胃腸佳膠囊中丹皮酚的含量，經方法學研究表明此方法具有樣品預處理簡單，回收率好，重復性好，專屬性強等優點，作為復方胃腸佳膠囊質量標準檢測方法，能夠更有效地控制該制劑的質量。
文章鏈接：中國化工儀器網 http://www.chem17.com/news/detail/27864.html