標題氣相色譜法測定頭孢匹胺中的殘留溶劑

【摘要】目的建立測定頭孢匹胺中的殘留溶劑含量的方法。方法采用氣相色譜法，用涂漬PEG��20M的填充柱,N2為載氣，柱溫100℃，以正丁醇為內標物，FID檢測。結果丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺分別在進樣量0.500～2.000μg、0.041～0.164μg和0.088～0.352μg范圍內,與相應溶劑峰/內標峰的面積比值線性關系良好（r分別為0.9997、0.9994和0.9999）,丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺的平均回收率分別為101.0%、97.7%和100.4%，重復進樣峰面積RSD分別為0.31%、1.28%和0.73%（n=5）。結論所建立的方法專屬性好，簡便準確，可用于檢測頭孢匹胺中的殘留溶劑。
　　
　　【關鍵詞】氣相色譜法頭孢匹胺殘留溶劑丙酮乙腈二甲基甲酰胺
　　
　　Abstract:ObjectiveToestablishamethodforcontentdeterminationoftheresidualsolventsincefpiramide.MethodsTheanalysiswasperformedonacolumncoatedbyPEG��20Munderthecolumntemperatureof100℃,withN2ascarriergas.ResultsThestandardcurvesofacetone,acetonitrileandN,N�瞕imethylformamidewerelinearwithintherangesof0.500～2.000μg,0.041～0.164μgand0.088～0.352μg（r=0.9997,0.9994and0.9999）,respectively.Theaveragerecoveriesofacetone,acetonitrileandN,N�瞕imethylformamidewere101.1%,97.7%and100.4%,whiletheRSDforreplicationswere0.31%,1.28%and0.73%（n=5）,respectively.ConclusionThemethodisspecific,simpleandaccurateforthequalitycontrolcefpiramiderawmaterials.
　　
　　Keywords:GC;cefpiramide;residualsolvent;acetone;acetonitril;N,N�瞕imethylformamide
　　
　　頭孢匹胺（cefpiramide）是第三代頭孢菌素類廣譜抗生素，可進一步加工成鈉鹽或直接用于臨床,對革蘭氏陽性菌、陰性菌及厭氧菌均有強大的抗菌活力，對β�矁弱０访阜�定性好，有良好的臨床價值［1］。由于各廠生產的頭孢匹胺采用工藝和使用的溶劑不同，因而殘留溶劑的種類也有所不同，需分別研究出適合的方法進行準確測定。本研究基于廣州白云山化學制藥廠生產的頭孢匹胺產品，其生產過程中使用到國際協調組織（ICH）規定的二類溶劑乙腈和二甲基甲酰胺，以及三類溶劑丙酮,應在質量標準中加以監控。已有文獻［2-3］報道類似品種頭孢匹胺鈉中殘留溶劑的測定方法，但由于被測殘留溶劑種類不同而不可直接引用。本文報道的氣相色譜法，專屬性強，能在同一次試驗中同時測定3種溶劑的含量，無需程序升溫，方法簡便準確。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　島津GC��14A氣相色譜儀；大連依利特公司產的涂漬PEG��20M的填充玻璃柱（3.2mm×2m）。丙酮和二甲基甲酰胺對照品（均為分析純試劑，含量100.0%），乙腈對照品（為色譜純試劑，含量100.0%），頭孢匹胺原料由廣州白云山化學制藥廠提供，高純度氮氣由廣州氣體廠生產。
　　
　　2方法與結果
　　
　　2.1色譜條件與測定法
　　
　　用涂漬PEG��20M的填充玻璃柱，以氮氣為載氣，流量10mL/min,進樣口溫度210℃，柱溫100℃，氫火焰離子化檢測器溫度250℃。
　　
　　稱取正丁醇適量，加水制成50μg/mL的溶液，作為內標液。精密稱取丙酮對照品約100mg、乙腈對照品約8mg和二甲基甲酰胺對照品約18mg置100mL量瓶中，加內標液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密稱取頭孢匹胺供試品約1g，置具塞試管中，準確加入內標液5mL，強力振搖5min，過濾，取續濾液作為供試品溶液。分別精密量取對照品溶液和供試品溶液1μL，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，用內標法以峰面積計算。
　　
　　2.2色譜參數、檢測限和定量限
　　
　　頭孢匹胺供試品溶液的色譜圖見圖1，丙酮、乙腈、正丁醇（內標）和二甲基甲酰胺峰柱效分別為850、800、600和1000，拖尾系數分別為1.4、1.2、1.3和1.3,丙酮與乙腈、乙腈與正丁醇及正丁醇與二甲基甲酰胺峰之間分離度分別為3.9、2.8和7.7。丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺的檢測限（信噪比3∶1）分別為1ng、0.5ng和0.5ng,定量限（信噪比10∶1）分別為2ng、1ng和2ng。
　　
　　a.丙酮;b.乙腈;c.正丁醇;d.二甲基甲酰胺
　　
　　圖1頭孢匹胺中的殘留溶劑氣相色譜圖（略）
　　
　　Fig.1GCChromatogramsoftheresidualsolventsintherawmaterials
　　
　　2.3精密度試驗
　　
　　取對照品溶液重復進樣5次，測得丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺峰面積與內標峰面積比的RSD分別為0.31%、1.28%和0.73%。同一份均勻樣品，在不同儀器、不同操作者條件下測得3份結果，算出丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺含量結果重現性分別為1.5%、1.9%和1.7%。
　　
　　2.4線性關系與范圍
　　
　　分別精密稱取丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺對照品,按“2.1”項方法分別用內標溶液定量配制并稀釋成質量濃度分別為丙酮500、750、1000、1500μg/mL，乙腈41、61.5、82、123、164μg/mL和二甲基甲酰胺88、132、176、264、352μg/mL的溶液，各準確進樣1μL測定，結果進樣量（m）與待測溶劑峰面積/內標峰面積比值（A）的線性回歸方程分別為：丙酮A1=9.4826m1-0.2456（r=0.9997）,乙腈A2=13.4495m2 0.03646（r=0.9994）,二甲基甲酰胺A3=4.3421m3 0.0094（r=0.9999）；丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺的進樣量測定范圍分別為0.500～2.000μg、0.041～0.164μg和0.088～0.352μg。
　　
　　2.5回收率試驗
　　
　　按“2.1”項方法,分別用內標液配制對照品溶液,供試品溶液，以及丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺的濃度均相當于對照品溶液的80%、100%和120%的供試品加對照品溶液各3份,依法進樣測定,算出丙酮、乙腈和二甲基甲酰胺的加樣回收結果如下：
　　
　　丙酮：100.1%、104.6%、100.5%、101.4%、102.9%、99.3%、100.0%、99.3%和100.8%，平均101.0%（RSD1.75%）。
　　
　　乙腈：97.1%、97.5%、96.1%、99.8%、96.6%、96.3%、99.0%、99.2%和97.9%，平均97.7%（RSD1.40%）。
　　
　　二甲基甲酰胺:101.2%、99.3%、100.8%、102.8%、101.4%、99.6%、99.3%、98.6%和101.0%，平均100.4%（RSD1.32%）。
　　
　　2.6樣品測定
　　
　　按“2.1”項方法分別測定頭孢匹胺樣品3批，測得其丙酮含量分別為：0.015%、0.013%和0.011%；乙腈含量分別為0.013%、0.011%和0.010%；二甲基甲酰胺含量分別為0.005%、0.002%、0.001%,均符合ICH建議的限度（0.5%、0.041%和0.088%）。
　　
　　3討論
　　
　　3.13種溶劑均有很好的水溶性，頭孢匹胺樣品加水強力振搖后形成極細微顆粒的混懸液，能保證殘留溶劑的溶出。
　　
　　3.2二甲基甲酰胺為較高沸點的溶劑，其水溶液難以采用頂空進樣法測定，且二甲基甲酰胺直接進樣對毛細管柱傷害較大，因而選用填充柱直接進樣法。
　　
　　3.3本試驗采用恒定柱溫條件下測定有利于測定穩定性，采用內標法有利于減少進樣操作的誤差。
　　
　　3.4以上試驗表明，本氣相色譜法專屬性強，能在恒定柱溫條件下同時測定3種殘留溶劑的含量，方法快捷準確，可用于頭孢匹胺殘留溶劑的監控。