標題氣相色譜法同時測定止癢搽劑中三組分的含量

　摘要：目的建立一種用氣相色譜法同時測定止癢搽劑中樟腦、薄荷腦、冰片三組分含量的方法。方法采用聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布濃度為10%）；柱溫155℃；進樣口溫度為190℃；FID檢測器，檢測器溫度250℃。結果樟腦在0.198～1.191mg/ml范圍內呈良好線性關系（r=0.99999），薄荷腦在0.132～0.790mg/ml范圍內呈良好線性關系（r=0.99999），冰片在0.139～0.833mg/ml范圍內呈良好線性關系（r=0.9999）；平均加樣回收率分別為：樟腦95.21%，RSD為1.58%（n=9），薄荷腦102.71%，RSD為1.29%（n=9），冰片99.33%，RSD為1.40%（n=9）。結論該法簡便快速，結果準確，可以有效地控制該藥品的質量。
　　
　　關鍵詞：氣相色譜法；止癢搽劑；樟腦；薄荷腦；冰片
　　
　　SimultaneousDeterminationofThreeComponentsinAntipruriticLinimentbyGC
　　
　　Abstract:ObjectiveToestabilshamethodforsimultaneousdeterminationofcamphor,menthol,andborneolinantipruriticlinimentbyGC.MethodsUsing10%PEG-20Mpackedcolumn.Thecolumntemperaturewasat155℃.Injectortemperaturewasat190℃.FIDdetectorwithtemperatureat250℃.ResultsCamphorshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.198～1.191mg/ml（r=0.99999），mentholshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.132～0.790mg/ml（r=0.99999），borneolshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.139～0.833mg/ml（r=0.9999）；theaveragerecoveryandtherelativestandarddeviation：Camphor95.21%,RSD1.58%（n=9），Menthol102.71%,RSD1.29%（n=9）,Borneol99.33%，RSD1.40%（n=9）.ConclusionThemethodisconvenient,rapidandaccurate,andcanbeusedforthequalitycontrolofthedrug.
　　
　　Keywords:GC；AntipruriticLiniment；Camphor；Menthol；Borneol
　　
　　痱子屬皮膚濕疹，為夏季常見皮膚病之一，盡管有其自限性，但發作時瘙癢難耐，皮膚滲透性差，影響患者的學習、工作和休息。針對痱子的生理特點，我們研制了止癢搽劑。臨床應用證明，止癢搽劑質量穩定，療效可靠，極大地減輕了患者的痛苦。在制定質量標準時，我們查閱了有關文獻［1~4］，并根據制劑特點及實驗室條件，建立了一種用氣相色譜法同時測定止癢搽劑中樟腦、薄荷腦、冰片三組分含量的方法。該法簡便快速，結果準確，可以有效地控制該藥品的質量。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　Agilent6820氣相色譜儀及色譜工作站；瑞士METTLERAE-240（0.01mg）電子天平；樟腦對照品（批號110747-200107，供含量測定用,中國藥品生物制品檢定所）；薄荷腦對照品（批號110728-200506，供含量測定用,中國藥品生物制品檢定所）；冰片對照品（批號110742-200516，供含量測定用,中國藥品生物制品檢定所）；萘（批號111673-200401，GC內標物，中國藥品生物制品檢定所）；止癢搽劑（批號060425，060427，060429，銅陵市人民醫院制劑中心）；無水乙醇為分析純。
　　
　　2方法與結果
　　
　　2.1色譜條件色譜柱聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布濃度為10%）；柱溫155℃；進樣口溫度190℃；FID檢測器，檢測器溫度250℃；進樣量2μl。在上述色譜條件下，樟腦、薄荷腦、龍腦、異龍腦與內標物峰之間的分離度均大于1.5，理論板數按樟腦峰計算大于2500，滿足試驗要求（見圖1a）。
　　
　　2.2溶液的制備及線性關系的考察
　　
　　2.2.1內標溶液的制備精密稱取萘適量，加無水乙醇溶解，并稀釋制成每毫升中約含4mg的溶液，搖勻，即得內標溶液。
　　
　　2.2.2對照品溶液的制備精密稱取適量樟腦對照品、薄荷腦對照品、冰片對照品于同一棕色量瓶中，加無水乙醇溶解，并稀釋制成每毫升中約含樟腦2mg，薄荷腦1.3mg，冰片1.3mg的溶液，即得對照品混合貯備液。
　　
　　2.2.3供試品溶液的制備精取樣品2ml，置25ml棕色量瓶中，加無水乙醇至刻度，搖勻，得樣品備用液；精密吸取樣品備用液1ml于10ml棕色量瓶中，精密加入內標溶液1ml，加無水乙醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
　　
　　2.2.4空白實驗按處方組成比例，取除三組分外的其它成分制成空白樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液。在上述色譜條件下，分別吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液各2μl，注入氣相色譜儀測定，記錄色譜圖，在與三組分峰保留時間相同處，無色譜峰出現。表明其它組分對三組分的測定無干擾，符合測定要求（見圖1c）。
　　
　　圖1GC色譜圖（略）
　　
　　2.2.5標準曲線的制備精密吸取對照品貯備液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml，分別置10ml棕色量瓶中，加內標溶液1ml，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照上述色譜條件測定，記錄色譜圖，分別以各自對照品峰面積與內標物峰面積的比值為縱坐標，進樣量（μg）為橫坐標，進行線性回歸，繪制標準曲線，得回歸方程為：樟腦A=-0.0016C 0.9736，r=0.99999，線性范圍為0.198～1.191mg/ml；薄荷腦A=0.00335C 0.9692，r=0.99999，線性范圍為0.132～0.790mg/ml；冰片A=0.00346C 0.9541，r=0.9999，線性范圍為0.139～0.833mg/ml。
　　
　　2.3精密度實驗精密吸取標準曲線制備項下的同一份對照品溶液重復進樣5次，以3組分對照品峰面積與內標物峰面積的比值計算，RSD分別為：樟腦1.21%，薄荷腦1.26%，冰片0.97%。
　　
　　2.4重復性實驗取同批樣品5份，按供試品溶液制備方法處理，在上述色譜條件下測定，結果平均含量分別為：樟腦47.29mg/ml，RSD為1.13%（n=5）；薄荷腦45.86mg/ml，RSD為1.61%（n=5）；冰片16.77mg/ml，RSD為0.92%（n=5）。
　　
　　2.5穩定性實驗取制備好的供試品溶液，按上述色譜條件，每間隔2h測定1次，RSD為1.37%（n＝6），結果表明樣品溶液在12h內比較穩定。
　　
　　2.6加樣回收率實驗取已知標示量的樣品適量于10ml棕色量瓶中，分別加入相當于樣品量的80%，100%，120%的樟腦對照品、薄荷腦對照品、冰片對照品溶液及1ml內標液，按供試品溶液制備方法處理，在上述色譜條件下測定，記錄各自的峰面積并計算。平均回收率分別為：樟腦95.21%，RSD為1.58%（n=9）；薄荷腦102.71%，RSD為1.29%（n=9）；冰片99.33%，RSD為1.40%（n=9）。結果見表1。
　　
　　2.7樣品的含量測定取不同批號的3批樣品（060425，060427，060429），在上述測定條件下測定，按內標法以峰面積計算樣品中樟腦、薄荷腦、冰片的含量。結果見表2。
　　
　　表1回收率實驗（略）
　　
　　表2樣品中樟腦、薄荷腦、冰片含量測定結果（略）
　　
　　3討論
　　
　　3.1止癢搽劑為有一定乙醇含量的醇制劑，在本文所建立的測定方法下，樣品無須任何處理，直接用無水乙醇稀釋至一定濃度即可。與文獻方法［5~7］相比，此方法更簡便快速，且分離度好，回收率高，可作為止癢搽劑及相關制劑的質量控制方法。
　　
　　3.2由于止癢搽劑中有成分易受空氣及紫外線的氧化而顏色變深，所以實驗操作時應使用棕色瓶，并注意避光操作，以免影響含量測定結果的準確度。
　　
　　3.3內標物篩選中，曾對水楊酸甲酯、聯苯、正十四烷、萘等進行試驗，結果以萘為內標較為理想，且陰性對照無干擾。
　　
　　3.4在所建立的色譜條件下，冰片中的龍腦和異龍腦成分能完全分離，冰片的含量以龍腦和異龍腦峰面積之和計算。