標題液相色譜儀的故障排除

2、 進樣器
分析結束后，應反復沖洗進樣口，防止樣品的交叉污染或堵塞。常見故障的分析與排除
既使日常精心維護的液相色譜儀，隨著使用時間的增加或使用者經驗不足也會出現一
些問題或故障�，F將液相色譜儀容易出現的故障及解決辦法介紹如下：
2．1
保留時間變化
保留時間的變化有三中情況：波動、縮短、延長。
保留時間出現波動時，應檢查柱溫是否處于恒溫狀態，如果設置為室溫，氣溫的變化
會引起保留時間的波動，應該設置為恒定溫度；等度和梯度間還沒有充分達到平衡狀態時， 應該用十倍以上柱體積的流動相去平衡色譜柱；緩沖液濃度太低時，應換用＞25mmol/L 的緩沖液；色譜柱被污染或已經接近柱壽命時，應更換保護柱或換新色譜柱。
保留時間縮短時，流速增加，應檢查流速的設定；柱溫高時，應檢查柱的設置；進樣量太大時，減少樣品用量或降低樣品濃度；流動相的組成發生了改變，比如流動相中易揮發有機相蒸發，兩相之間互溶不好，會導致流動相不均勻或某一相出現部分沉淀；流動相的 PH 值應保持 3~7.5 范圍內，否則會引起柱鍵合相的流失。
保留時間延長時，流速減小，應檢查流速的設定和管路是否有泄露；柱溫低時，檢查
柱溫的設置；流動相的組成發生了改變，比如流動相中易揮發有機相蒸發，兩相之間互溶不好，會導致流動相不均勻或某一相出現部分沉淀；檢查流動相的 pH 值是否 3~7.5 范圍內，否則會引起柱鍵合相的流失。
2．2 峰拖尾
色譜柱超載時，要減少進樣量或稀釋樣品或使用高溶量的色譜柱；色譜柱性能不佳時，更換色譜柱；死體積或柱外體積過大時，將連接降至最低，并對所有連接點作合理的調整，盡可能采用細內徑的連接；加入硅羥基，其作用是純化色譜柱，增加緩沖液的濃度，降低流動相的 pH 值，純化樣品；出現峰干擾時，應清潔樣品，調整流動相。
2．3 峰展寬
進樣體積過大時，用流動相配樣；樣品過載時，進小濃度、小體積樣品；在進樣閥中
造成峰擴展時，進樣前后排出氣泡，以降低擴散；流動相粘度過高時，提高柱溫，并采用低粘度流動相；等度洗脫，保留時間過長時，要增加流速或改用梯度洗脫；柱外體積過大時，[1] 將連接管徑和連結管降至最小 。
2．4基線噪聲
流動相或檢測器中有氣泡時，要對流動相進行脫氣處理；檢測器燈有連續噪聲時，更
換氘燈；出現由污染引起的隨機噪聲時，應清洗色譜柱、凈化樣品、使用 HIPLC 級試劑；偶然有噪聲時，可能是來自電源的干擾，如果電壓不穩時，應采用穩壓電源。
2．5肩峰或分叉
進樣量太大或樣品濃度過高時，要減少進樣量或稀釋樣品；樣品溶劑太強時，應使用軟弱的樣品溶劑；色譜柱性能欠佳時，應更換色譜柱。
2．6鬼峰
色譜柱未達到平衡時，要繼續平衡色譜柱；樣品中溶劑出峰時，使用流動相作樣品的
溶劑；出現進樣閥殘余峰時，使用強溶劑清洗進樣閥，并改進閥和樣品的清洗程序；流動相用水不合格率，應使用 HPLC 級的水。
3、 使用注意事項
在使用混合溶劑作流動相時，一定要先混合，再過 0.45um 濾膜；等流動相恢復至室溫，用超聲波或 He 氣進行脫氣處理后，方可使用。
更換流動相時，必須按一定的程序進行，否則會產生問題。更換流動相有三種情況：互溶性流動相的更換、無互溶性流動相的更換和緩沖溶液的更換。對于第一種情況，先用準備更換的流動相把吸濾器完全清洗干凈，再打開儀器的排液閥，按清洗鍵，清洗泵中的流動相。
將吸濾器放入新流動腥中，減慢流速清洗數分鐘后關閉排液閥。接下來清洗色譜柱和檢測器檢測池直到基線平穩。對于第二種情況，先用與新舊流動相都互溶的中間清洗液（如：異丙醇）清洗，再用新流動相清洗，具體過程與第一種情況相同。對于第三情況，應先用蒸餾水作為中間清洗液進行清洗，再用新流動相清洗即可。