標題高效液相色譜常見故障的判定

故障可能原因解決方法
（一） 保留時間變化1 柱溫變化柱恒溫，必要時需配置恒溫箱
2 等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動相平衡柱
3 緩沖液容量不夠用>25mmol/L的緩沖液
4 柱污染每天沖洗柱
5 柱內條件變化穩定進樣條件，調節流動相
6 柱快達到壽命采用保護柱
（二） 保留時間縮短1 流速增加檢查泵，重新設定流速
2 樣品超載降低樣品量
3 鍵合相流失流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向
4 流動相組成變化防止流動相蒸發或沉淀
5 溫度增加柱恒溫
（三） 保留時間延長1 流速下降管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內氣泡
2 硅膠柱上活性點變化用流動相改性劑，如加三乙胺，或采用堿至鈍化柱
3 鍵合相流失同前（二）3
4 流動相組成變化同前（二）4
5 溫度降低同前（二）5
（四） 出現肩峰或分叉1 樣品體積過大用流動相配樣，總的樣品體積小于第一峰的15%
2 樣品溶劑過強采用較弱的樣品溶劑
3 柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件
4 柱內燒結不銹鋼失效更換燒結不銹鋼，加在線過濾器，過濾樣品
5 進樣器損壞更換進樣器轉子
（五） 鬼峰1.進樣閥殘余峰每次用后用強溶劑清洗閥，改進閥和樣品的清洗
2.樣品中未知物處理樣品
3.柱未平衡重新平衡柱，用流動相作樣品溶劑 （尤其是離子對色譜）
4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽譜）每天新配，用抗氧化劑
5.水污染（反相）通過變化平衡時間檢查水質量，用HPLC級的水
（六） 基線噪聲1 氣泡（尖銳峰）流動相脫氣，加柱后背壓
2 污染（隨機噪聲）清洗柱，凈化樣品，用HPLC級試劑
3 檢測器燈連續噪聲更換氘燈
4 電干擾（偶然噪聲）采用穩壓電源，檢查干擾的來源（如水浴等）
5 檢測器中有氣泡流動相脫氣，加柱后背壓
（七） 峰拖尾1 柱超載降低樣品量，增加柱直徑采用較高容量的固定相
2 峰干擾清潔樣品,調整流動相
3 硅羥基作用加三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度，降低流動相PH值，鈍化樣品
4 同前（四）4同前（四）4
5 同前（四）3同前（四）3
6 死體積或柱外體積過大連接點降至最低，對所有連接點作合適調整，盡可能采用細內徑的連接管
7 柱效下降用較低腐蝕條件，更換柱，采用保護柱
（八） 峰展寬1 進樣體積過大同（四）1
2 在進樣閥中造成峰擴展進樣前后排出氣泡以降低擴散
3 數據系統采樣速率太慢設定速率應使每峰大于10點
4 檢測器時間常數過大設定時間常數為感興趣第一峰半寬的10%
5 流動相粘度過高增加柱溫，采用低粘度流動相
6 檢測池體積過大用小體積池，卸下熱交換器
7 保留時間過長等度洗脫時增加溶劑含量也可用梯度洗脫
8 柱外體積過大將連接管徑和連接管長度降至最小
9 樣品過載進小濃度小體積樣品