高回收率(75%-105%)，多種樣品的低成本提取方法；高重復性；檢測過程只需要不到1.5小時；五合一處理方法更省時、經濟、環保。

產品概述

柱孢藻毒素檢測試劑盒酶聯免疫反應測試盒基于競爭性酶聯反應原理，含有柱孢藻毒素檢測試劑盒(SEM)的抗體已經包被于微孔板上。藥物分析時，樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM，會競爭SEM抗體，抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結合。加入底物后，產物的顏色強弱與樣品中SEM的濃度成反比。

 試劑盒組成

已包被的酶標板（可拆式）                                            12×8 孔

標準液（0，0.025，0.1，0.4，1.6，6.4ppb）                              6×2.0mL

回收用10ppb(Spiking)——可選                                        1×0.8ml

HRP酶標抗原(HRP-Conjugated)                                         1×6mL

10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer)                             1×25mL

20×濃縮洗液(Wash Solution)                                          1×30mL

終止液(Stop Buffer)                                                  1×20mL

TMB底物(TMB Substrate)                                               1×10mL

50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde)                               1×1.8mL

本試劑盒應當在2-8℃的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒，

請將SEM-HRP酶標抗原放置-20℃或者冰凍保存。

檢測試劑盒以外需要提供的設備或材料

1)      酶標儀(450 nm)

2)      恒溫培養箱

3)      勻漿器

4)      蒸干器

5)      漩渦振蕩器

6)      移液槍(50，100mL，1mL各一支)

7)      多道移液器（50-300mL）

8)      乙酸乙酯

9)      0.1M K₂HPO₄

10) 正己烷

注意事項

實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得*佳實驗效果。

1)      標準品中含有柱孢藻毒素檢測試劑盒，請小心使用。

2)      不要使用過期的試劑盒。

3)      不同批次的試劑盒不要混用，抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。

4)      盡量保持室溫20-25℃，避免在通風口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應該鋪墊若干紙巾或者其他物料。

5)      水質量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。

6)      加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。

7)      孵育時間的計算越規范越好，保持添加標準品的一致性，先添加標準品后添加樣品。

8)      從低濃度到高濃度地添加標準品，降低影響標準品曲線質量的風險。

9)      將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中，冷藏保存。

樣品的準備【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

確保樣品的正確保存，一般來說，樣品在2-4只能保存1-2天，如果要保存更長時間，就要保存在-20冷凍保存，在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內解凍。

1×樣品提取液

按1：9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。

1）飼料（用于檢測添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動物組織的SEM）

（1）    取0.5g勻質樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋振蕩1min；

（2）    50°C恒溫培養3小時，在培養期間，每1h振蕩5秒；

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉速渦旋震蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL乙酸乙酯上清液（含0.25g初始樣品）到另一試管（避免觸及下層水相！如果

移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，轉速渦旋振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

稀釋倍數：4.0

2）魚/蝦/肉（牛肉/雞肉/豬肉）：可用于五合一前處理方法

（1）    稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛，渦旋震蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養3h，培養期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下（20-25℃）4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），如果出現乳化現象，上清液不足3mL，請85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；（注：肝臟組織富含脂肪、色素等，為防止乳化現象，建議選用4mL正己烷溶解，渦旋震蕩30秒后，再進行下一步操作）

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩1分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉蒸發開始。

稀釋倍數：2.0

3）雞蛋【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

（1）    稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL蒸餾水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩30秒；

（2）    50°C恒溫培養3小時，在培養期間，每1h振蕩5秒；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH， 6 mL 乙酸乙酯，渦旋震蕩振蕩30s；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮氣吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品抽提工作液體，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100µL下清液，進行樣品測試。

稀釋倍數：2.0

注意：為了避免過高的背景值，建議用空白樣品做平行，從取3ml乙酸乙酯上清旋轉蒸發開始。

4）蜂蜜

（1）    稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）    50°C恒溫培養3小時；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（3）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉速振蕩1min；

（4）    室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

稀釋倍數：2.0

5）牛奶

（1）    對于含脂牛奶，取待測牛奶樣品3ml室溫4000g，5min。除去上層脂肪層。（對于脫脂奶粉，次步略）

（2）    取1ml樣品，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養3小時；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH，6 mL 乙酸乙酯，轉速振蕩1min；室溫下4000g離心10分鐘；

（5）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（6）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（8）    室溫下4000g離心10分鐘；

（9）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

     稀釋倍數：2.0

6）血清【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

（1）        稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（2）        50°C恒溫培養3小時；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（3）        加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉速振蕩1min；

（4）        室溫下4000g離心10分鐘；

（5）        取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移

取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（6）        用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（7）        加入1mL1×樣品提取液，劇烈

（8）        振蕩2分鐘；

（9）        室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

     稀釋倍數：2.0

7）尿樣

（1）    取3ml尿樣，4000g離心5min。

（2）    離心后稱取1ml，加入0.5mL1×樣品提取液，3.5mL雙蒸水，0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛，劇烈振蕩1分鐘；

（3）    50°C恒溫培養3小時；（說明書后的**標記方法可供選擇）

（4）    加入5mL 0.1 M K₂HPO₄，0.4 mL 1 M NaOH ， 6 mL 乙酸乙酯，轉速振蕩1min；

（5）    室溫下4000g離心10分鐘；

（6）    取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管（避免觸及下層水相！如果移取液中含有水相，再次4000g離心5分鐘，取上層有機相），在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干；

（7）    用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品；

（8）    加入1mL1×樣品提取液，劇烈振蕩2分鐘；

（9）    室溫下4000g離心10分鐘；

（10）    每孔取100 µL下清液，進行樣品測試。

稀釋倍數：2.0

檢測步驟

試劑的準備

注意：試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時，確定在使用前閱讀過注意事項。準備適量的檢測用試劑，所有的試劑搖勻后使用。準備足夠所有小管所需的用量，不能將試劑倒回原來的瓶子中，處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風險。

1x洗液的制備

1體積的20x洗液同19體積的蒸餾水混合

檢測

\以下為計算份量的表格，用戶可根據自己的需要來確定需要配置多少試劑。

（1）    加入100mL的標準品于所設定的孔中；

（2）    加入100mL的樣品于所設定的孔中

（3）    在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP，輕敲微孔板邊緣混勻1分鐘；

（4）    室溫（22.5±2.5）°C避光孵育30分鐘；

（5）    洗板3次，每次應該加入250mL 1×洗液，*后一次使板盡量甩干并在吸水紙上吸干；

（6）    每孔加入100mL的TMB底物；

（7）    在室溫（22.5±2.5）°C避光孵育20分鐘后，每孔加入100mL的終止液終止反應;

（8）    在450nm或450/650nm下讀OD值 (讀數前，用吸水紙將板底部的指痕和水分擦去，避免影響讀數)。

10．結果計算【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

（1）    分別計算標準、質控和樣品的平均吸光度值和相對吸光度值。

相對吸光度值 (%) = (標準或樣品吸光度值/零標準吸光度值) ´ 100

（2）    以相對吸光度值為縱坐標，標準濃度為橫坐標建立標準曲線。

（3）    從標準曲線上讀取質控和樣品的濃度值。

（4）    樣品檢測下限計算方法如下：

樣品檢測下限 = (0.025ng/g) ´ (稀釋倍數)

樣品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀釋倍數)

例如，肉類樣品的稀釋倍數是2.0,那么肉類樣品的檢測下限是0.05ppb,定量檢測下限是0.2ppb。

800372     Shipping, Postage, Packaging (express)            CNY                             

800373     Data Carrier              CNY                              【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

9019521  ZLV ADAPTER KIT M&N 8 STRIP                CNY                             

9019595  ZLV Bush, tip stripper, Cx8                 CNY                             

9019935  Cable harness, X-axis 8 core, CQX              CNY                             

9020596  Tape Foam,045X750 Double Stick,DML 3000           CNY                             

9017843  Tool, cable, communication, RS232, QIAC                CNY                             

9013401  Cable set, cooling system, 90/120             CNY                             

9234873  ZLVPipetting Station for 2 microtit.                   CNY                             

9013395  Tip disposal bags               CNY                             

9013391  Tubing set, PVC, BR9604          CNY                             

9013268  Cable, card-X to solenoid valve, 24V                  CNY                             

9013222  Holder, tube, STS, single, 11 ml (30), 0             CNY                             

9013204  Transportation kit, BR8000               CNY                             

9011759  Reagent holder, 4-tube 13ml  Holder for accommodating 4 microcentrifuge tubes (13 ml) on the worktable; must be used with the reagent holder tray   CNY                             

9011672  Reader Abdeckung spez. GSG (9194)                CNY                             

132605     NeXtal Stock Sodium ac. H2O (50)   1.6M Sodium acetate trihydrate - 50mL (4 x 12,5 ml tube)    CNY                             

800141     Investigation grade sequencing, w/ prep         "Single-stranded sequencing of an unknown sequence

QIAGEN DNA template preparation

Design ａnd synthesis of walking primers

Data assembly ａnd sequence alignment

Accuracy >99%"       CNY                              【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

767134     PAXgene Tissue DNA Kit (50)            CNY                             

929605     QX Mineral Oil (50 ml)               CNY                             

330513     RT² SYBR Green Fluor qPCR Mastermix (24)             CNY                             

330502     RT² SYBR Green qPCR Mastermix (12)              CNY                             

330401     RT² First Strand Kit (12)            CNY                             

9010813  BGR Stirrer PK80               CNY                             

69506       DNeasy Blood & Tissue Kit (250)     250 DNeasy Spin Columns, QIAGEN Proteinase K, Buffers, Collection Tubes (2 ml)         CNY                             

63204       DyeEx 2.0 Spin Kit (50)     50 DyeEx Spin Columns, Collection Tubes (2 ml)       CNY                             

211392     Internal Control DNA (High conc.)            CNY                             

9012755  Set, Tubing, Washer, P3            CNY                             

9010126  Washer boat             CNY                             

979015     MOTT 16S Primer 1 for Sequencing                   CNY                             

979010     PyroMark Vacuum Prep Filter Probe (100)      Re-usable filter probes for PyroMark Vacuum Workstation Q96 ａnd Q24.         CNY                             

59720       EpiTect Fast 96 DNA Bisulfite Kit               CNY                             

9002245  QIAcube(220-240v) Promo, PrioPLUS      QIAcube (220-240V) Promo Priority includes the QIAcube instrument +promo iPad, installation ａnd extended warranty. Installation covers hardware ａnd software installation of system ａnd provides user with introductory training. Priority package extends warranty period of the system to 3 years. One preventive maintenance visit is included for each year of the warranty; 3 preventive maintenance visits in total. Service package includes all parts, labor ａnd travel costs with a service response time of 48 hours (2 working days). Performance of the installation ａnd service visits are documented on a GMP/GLP-compliant Field Service documents.        CNY                             

QYC405    犬支原體抗體金標檢測卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC406    犬冠狀病毒檢測試紙卡         20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC407    犬腺病毒II 型檢測試紙卡   20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC408    犬副流感病毒檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC409    犬心絲蟲抗原檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC410    犬狂犬病毒抗原檢測試紙卡         20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC411    犬腺病毒1型檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC412    犬流感檢測試紙卡         20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC413    貓瘟病毒檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                 【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

QYC414    貓傳染性腹膜炎病毒檢測試紙卡         20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC415    貓白血病病毒檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC416    貓免疫缺陷病毒檢測試紙卡         20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC417    利什曼蟲檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC418    鸚鵡熱衣原體檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC419    布氏桿菌抗體檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC420    布氏桿菌抗原檢測試紙卡     20T/盒      抗血清檢測診斷                                

QYC501    蔬菜農藥速測卡     20T/盒      蔬菜農藥殘留檢測                                    

QYC502    茶葉農藥速測卡     20T/盒      茶葉農藥殘留檢測                                    

QYC503    "糧食農藥速測卡

"       20T/盒      糧食農藥殘留檢測                                    

QYC504    蔬菜農藥檢測卡     20T/盒      蔬菜農藥殘留檢測                                    

QYC505    高靈敏度農藥速測卡     20T/盒      蔬菜農藥殘留檢測                                    

QY101      鹽酸克倫特羅檢測試劑盒     96孔/盒 各種動物肌肉組織、肝臟、尿液、血清、飼料等                                

QY102      萊克多巴胺檢測試劑盒         96孔/盒 各種動物肌肉組織、肝臟、尿液、血清、飼料等                                

QY103      沙丁胺醇檢測試劑盒     96孔/盒 各種動物肌肉組織、肝臟、尿液、血清、飼料等                                

QY104      β-興奮劑檢測試劑盒   96孔/盒 各種動物組織/水產/蜂蜜                                  【柱孢藻毒素檢測試劑盒】

QY105      呋喃唑酮代謝物檢測試劑盒         96孔/盒 各種動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY106      呋喃它酮代謝物檢測試劑盒         96孔/盒 各種動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY107      呋喃妥因代謝物檢測試劑盒         96孔/盒 各種動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY108      呋喃西林代謝物檢測試劑盒         96孔/盒 各種動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY109      孔雀石綠檢測試劑盒     96孔/盒 動物組織/水產/飼料                                 

QY110      氯霉素檢測試劑盒         96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY111      氟苯尼考檢測試劑盒     96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜                                 

QY112      氟苯尼考胺檢測試劑盒         96孔/盒 動物組織/水產/蜂蜜