ELISA 檢測的目的是為實驗提供準確可靠的定量分析實驗依據。為了保證實驗數據的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面質量控制和全過程質量控制。在收集標本前都必須有一個完整的計劃。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490

注意事項：

◆   每個標本量收集體積＝  100ul × 檢測種類，如要做復孔，標本量收集體積＝  100ul × 檢測種類×2 。

◆   對于作某一個具體指標來說，先用一系列稀釋度作一批標本測定，得出對實驗有意義的一個稀釋度（即測定劑量反應曲線），然后用一個*適稀釋度測定即可。

◆   收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃ 或-70℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存48 小時.-20℃ 可保存1個月。 -70 度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

◆   血清標本采集時，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以 HRP為標記的 ELISA 測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。

【三聚氰胺試紙條】◆   為了保證尿液檢測結果的準確性，必須正確收集尿液標本和保存。盛尿容器要清潔干燥。使用一次性的容器（如塑料尿杯），避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染，影響檢測結果。尿液標本必須新鮮，留取后，應及時檢測或保存，以免細菌繁殖。因在室溫中久置后（尤其是夏季）尿中磷酸鹽等可析出結晶而干擾檢測。

◆    標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性 HRP，也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在 ELISA中可使本底加深。

◆   凍結標本融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。

◆   混濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。

◆   反復凍融會使蛋白效價降低，所以待測標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。也可加入適當防腐劑。

◆   如果您在實驗中遇到任何特殊問題，敬請咨詢 021-60348496標本類型

ELISA常見的標本一般包括：

◆   液體類標本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

◆   培養細胞

◆   組織標本

這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

【三聚氰胺試紙條】標本的保存

一般說來，在 5 天內測定的標本可放置于 4℃，超過一周測定的需低溫凍存。

對收集后當天進行檢測的標本，儲存在  4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標本， 將標本及時分裝后放在  -20 ℃ 或  -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。 標本  2 -8 ℃ 可保存  48 小時，-20 ℃ 可保存  1 個月。-70 度可保存  6 個月。部分標本也可加入適當防腐劑，激素類標本需添加抑肽酶。標本的處理 可用作 ELISA 測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、細胞培養上清、細胞、組織等均可作標本以測定其中某種成份。有些標本可直接進行測定，有些則需經預處理。

◆ 血清：  

室溫血液自然凝固  10-20 分鐘后，離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉  / 分）。收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。  

◆ 血漿：  

應根據試劑盒的要求選擇  EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入  10 ％（  v/v ）抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或  1% heparin 或  2.0%EDTA.Na2) 混合  10-20 分鐘后，離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉  / 分）。仔細收集上清如有沉淀形 成，應再次離心。  

【三聚氰胺試紙條】◆ 尿液、胸腹水、腦脊液：  

用無菌管收集。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉  / 分）。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。  

◆ 細胞培養上清：  

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉  / 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的 成份時，用  PBS （  PH7.2-7.4 ）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到  100 萬 /ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉 / 分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。  

◆ 細胞：

檢測細胞的成份時，對于貼壁細胞，去除培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。加入適量裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞10 秒后，細胞就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍.加入適量裂解液, 用槍吹打把細胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5 分鐘，取上

清，即可進行后續操作。

【三聚氰胺試紙條】◆ 組織標本：  

切割標本后，稱取重量。加入一定量的  PBS或組織蛋白萃取試劑，緩沖液中可加入蛋白酶抑制劑。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心  20 分鐘左右（  2000-3000 轉  / 分）。仔細收集上清置于  -20 度或  - 70 度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490  

70022     Oligotex mRNA Mini Kit For 12 mRNA minipreps: 200 ul Oligotex Suspension, Small Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml), RNase-free Reagents ａnd Buffers  CNY                           

19560     Collection Microtubes (racked)     Nonsterile polypropylene tubes (1.2 ml), 960 in racks of 96       CNY                           

19157     QIAGEN Protease (30 AU)    4 x 7.5 Anson units per vial (lyophilized)      CNY                           

19075     Buffer AL       216 ml for 1000 preps   CNY                           

13343     Blood & Cell Culture DNA Midi Kit       25 QIAGEN Genomic-tip 100/G, QIAGEN Protease, Buffers     CNY                           

12981     QIAGEN Plasmid Plus Mega Kit (5)     QIAGEN Plasmid Plus Kits enable ultrafast, large-scale plasmid purification of pure plasmid DNA. The use of a vacuum manifold allows purification of up to 12 (Mega ａnd Giga) or up to 24 (Midi ａnd Maxi) samples in parallel with low hands-on needs. Low elution volumes yield highly concentrated plasmid DNA for direct use without ethanol precipitation. QIAGEN Plasmid Plus Kits also feature a novel wash buffer for endotoxin reduction. CNY                           

12381     EndoFree Plasmid Mega Kit (5)     5 QIAGEN-tip 2500, Reagents, 5 QIAfilter Mega-Giga Cartridges, Endotoxin-free Buffers    CNY                           

133282    NeXtalStock Trimethylamine N-Oxide (100)              CNY                            【三聚氰胺試紙條】

133259    NeXtalStock HEPES sod. salt pH 8.5 (200)         CNY                           

337630    qBiomarker SYBR Green ROX Mastermix (2)            CNY                           

4501163  artus EBV TM PCR Kit (24) CE           CNY                           

949004    Autopure RBC Lysis Solution (9500 ml)              CNY                           

336841    Cignal Reporter Assay Kit             CNY                           

990380    Rack Labeling Strips, Accessory Set            CNY                           

990012    Disposable Tips, 50µl (960)          CNY                           

330621    RT² SYBR Green ROX FAST Mastermix (8)              CNY                           

330620    RT² SYBR Green ROX  FAST Mastermix (2)            CNY                           

9010854  Motor, gripper V ａnd handler V            CNY                           

981400    Rotor-Disc OTV Kit (1) "Kit for optical temperature verification of Rotor-Gene systems (includes a Rotor-Disc preloaded with thermochromatic liquid crystals, fluorescent inserts, CD with calibration files)

REQUIRES ROTOR-DISC 72 ROTOR AND LOCKING RING OR ROTOR-DISC 72 STARTER KIT"  CNY                           

133244    NeXtalStock Sodium malonate pH 6.0 (200)        CNY                           

9010363  LabHand, standard for Plato 1              CNY                           

979105    PyroMark Q96 HS Tip Storage Box             CNY                           

310107    BioMag Goat Anti-Rat IgG (500ml)      BioMag goat anti-rat IgG secondary antibody suspension (1 mg/ml)   CNY                           

9002271  PyroMark Q24 Advanced Instrument           CNY                            【三聚氰胺試紙條】

206542    Type-it HRM PCR Kit (100)         CNY                           

206401    QIAGEN LongRange PCR Kit (20)       For 20 PCR rxns a 50 µl: Enzyme Mix (Taq ａnd Proofreading Enzyme, (5 u/µl), 10 x PCR Buffer for increased fidelity (contains dNTP´s), 25 mM MgCl2, 5 x Q-Solution    CNY                           

9012714  Tubing set, auto vac, BR8000              CNY                           

9012708  Peristaltic Pump Outlet Tubing 3100,4002           CNY                           

9002171  QIAcube (230V) HID Diff. Washing Station        CNY                           

929530    QX Alignment Marker 15 bp/600 bp (1.5ml)        CNY                           

971480    therascreen® EGFR Pyro Kit (24) CE         CNY                           

133214    NeXtalStock MMT pH 4.0 (200)          CNY                           

301702    HiPerFect Transfection Reagent (0,1ml)             CNY                           

QKT0729       層黏蛋白LN化學發光檢測試劑盒            96T                     

QKT0730       Ⅲ型前膠原PCⅢ化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0731       Ⅳ型膠原C-Ⅳ化學發光檢測試劑盒          96T                     

QKT0732       透明質酸HA化學發光檢測試劑盒            96T                     

QKT0733       促甲狀腺素TSH化學發光檢測試劑盒             96T 北京福瑞生物                    

QKT0734       血清甲狀腺素T4化學發光檢測試劑盒            96T                     

QKT0735       血清三碘甲狀腺原氨酸T3化學發光檢測試劑盒            96T                     

QKT0736       血清游離四碘甲狀腺原氨酸FT4化學發光檢測試劑盒          96T                     

QKT0737       血清游離三碘甲狀腺原氨酸FT3化學發光檢測試劑盒          96T                     

QKT0738       甲狀腺球蛋白TG化學發光檢測試劑盒           96T                     

QKT0739       甲狀腺球蛋白抗體TGA化學發光檢測試劑盒         96T                     

QKT0740       促甲狀腺激素受體抗體TRAb化學發光檢測試劑盒        96T                     

QKT0741       甲狀腺微粒體抗體TMAb化學發光檢測試劑盒              96T                     

QKT0742       抗甲狀腺過氧化物酶抗體Anti-TPO化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0743       血清反三碘甲狀腺原氨酸rT3化學發光檢測試劑盒              96T                      【三聚氰胺試紙條】

QKT0744       卵泡刺激素FSH化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0745       黃體生成素LH化學發光檢測試劑盒        96T                     

QKT0746       人絨毛膜促性腺激素HCG/β-HCG化學發光檢測試劑盒              96T                     

QKT0747       催乳素PRL化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0748       雌二醇E2化學發光檢測試劑盒         96T                     

QKT0749       游離雌三醇FE3化學發光檢測試劑盒              96T                     

QKT0750       孕酮PROGESTERONE化學發光檢測試劑盒          96T                     

QKT0752       睪酮TEST化學發光檢測試劑盒        96T                     

QKT0753       游離睪酮FreeTestosterone化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0754       C-肽C-PEPTIDE化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0755       胰島素INSULIN化學發光檢測試劑盒             96T                     

QKT0756       胰島素樣生長因子IIGF-I化學發光檢測試劑盒              96T                     

QKT0757       抗人胰島素抗體IAA化學發光檢測試劑盒              96T                     

QKT0758       胰島素原PROINS化學發光檢測試劑盒           96T                     

QKT0759       谷氨酸脫羧酶抗體GAD65化學發光檢測試劑盒            96T                     

QKT0760       鐵蛋白Ferritin化學發光檢測試劑盒         96T                      【三聚氰胺試紙條】

QKT0761       血清甲胎蛋白AFP化學發光檢測試劑盒          96T                     

QKT0762       癌胚抗原CEA化學發光檢測試劑盒          96T