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高回收率(75%-105%),多種樣品的低成本提取方法;高重復性;檢測過程只需要不到1.5小時;五合一處理方法更省時、經濟、環保。
產品概述
迪美唑檢測試劑盒酶聯免疫反應測試盒基于競爭性酶聯反應原理,含有迪美唑檢測試劑盒(SEM)的抗體已經包被于微孔板上。藥物分析時,樣品同SEM-HRP共同被添加到板孔中。如果樣品中含有SEM,會競爭SEM抗體,抑制SEM-HRP與板上包被的抗體結合。加入底物后,產物的顏色強弱與樣品中SEM的濃度成反比。
試劑盒組成
已包被的酶標板(可拆式) 12×8 孔
標準液(0,0.025,0.1,0.4,1.6,6.4ppb) 6×2.0mL
回收用10ppb(Spiking)——可選 1×0.8ml
HRP酶標抗原(HRP-Conjugated) 1×6mL
10×樣品提取液(Sample Extraction Buffer) 1×25mL
20×濃縮洗液(Wash Solution) 1×30mL
終止液(Stop Buffer) 1×20mL
TMB底物(TMB Substrate) 1×10mL
50mM 2-硝基苯甲醛(2-Nitrobenzaldehyde) 1×1.8mL
本試劑盒應當在2-8℃的溫度下儲存,有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒,
請將SEM-HRP酶標抗原放置-20℃或者冰凍保存。
檢測試劑盒以外需要提供的設備或材料
1) 酶標儀(450 nm)
2) 恒溫培養箱
3) 勻漿器
4) 蒸干器
5) 漩渦振蕩器
6) 移液槍(50,100mL,1mL各一支)
7) 多道移液器(50-300mL)
8) 乙酸乙酯
9) 0.1M K2HPO4
10) 正己烷
注意事項
實驗前請閱讀以下文字,以保證獲得*佳實驗效果。
1) 標準品中含有迪美唑檢測試劑盒,請小心使用。
2) 不要使用過期的試劑盒。
3) 不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。
4) 盡量保持室溫20-25℃,避免在通風口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發。同樣的,不要在陽光直射下實驗,防止過熱及蒸發。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應該鋪墊若干紙巾或者其他物料。
5) 水質量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水。
6) 加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。
7) 孵育時間的計算越規范越好,保持添加標準品的一致性,先添加標準品后添加樣品。
8) 從低濃度到高濃度地添加標準品,降低影響標準品曲線質量的風險。
9) 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存。
樣品的準備【迪美唑檢測試劑盒】
確保樣品的正確保存,一般來說,樣品在2-4只能保存1-2天,如果要保存更長時間,就要保存在-20冷凍保存,在用之前需要將冷凍的樣品在室溫下或冰箱內解凍。
1×樣品提取液
按1:9的比例配制樣品提取濃縮液和雙蒸餾水。
1)飼料(用于檢測添加到飼料中的魚粉、蝦粉或動物組織的SEM)
(1) 取0.5g勻質樣品,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCl和20 µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,渦旋振蕩1min;
(2) 50°C恒溫培養3小時,在培養期間,每1h振蕩5秒;
(3) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH,6 mL 乙酸乙酯,轉速渦旋震蕩1min;
(4) 室溫下4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL乙酸乙酯上清液(含0.25g初始樣品)到另一試管(避免觸及下層水相!如果
移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60-70 °C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(7) 加入1mL1×樣品提取液,轉速渦旋振蕩2分鐘;
(8) 室溫下4000g離心10分鐘;
(9) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:4.0
2)魚/蝦/肉(牛肉/雞肉/豬肉):可用于五合一前處理方法
(1) 稱取1g勻漿樣品加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCl和20µL50 mM 2-硝基苯甲醛,渦旋震蕩30秒;
(2) 50°C恒溫培養3h,培養期間,每1h振蕩5秒;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(3) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH, 6 mL 乙酸乙酯,渦旋震蕩振蕩30s;
(4) 室溫下(20-25℃)4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品)到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),如果出現乳化現象,上清液不足3mL,請85℃水浴3分鐘。在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;(注:肝臟組織富含脂肪、色素等,為防止乳化現象,建議選用4mL正己烷溶解,渦旋震蕩30秒后,再進行下一步操作)
(7) 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩1分鐘;
(8) 室溫下4000g離心10分鐘;
(9) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
注意:為了避免過高的背景值,建議用空白樣品做平行,從取3ml乙酸乙酯上清旋轉蒸發開始。
稀釋倍數:2.0
3)雞蛋【迪美唑檢測試劑盒】
(1) 稱取1g雞蛋樣品加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL蒸餾水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩30秒;
(2) 50°C恒溫培養3小時,在培養期間,每1h振蕩5秒;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(3) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH, 6 mL 乙酸乙酯,渦旋震蕩振蕩30s;
(4) 室溫下4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60-70℃減壓蒸餾或60-70℃氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(7) 加入1mL1×樣品抽提工作液體,劇烈振蕩2分鐘;
(8) 室溫下4000g離心10分鐘;
(9) 每孔取100µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:2.0
注意:為了避免過高的背景值,建議用空白樣品做平行,從取3ml乙酸乙酯上清旋轉蒸發開始。
4)蜂蜜
(1) 稱取1g蜂蜜加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
(2) 50°C恒溫培養3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(3) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,轉速振蕩1min;
(4) 室溫下4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(7) 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
(8) 室溫下4000g離心10分鐘;
(9) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:2.0
5)牛奶
(1) 對于含脂牛奶,取待測牛奶樣品3ml室溫4000g,5min。除去上層脂肪層。(對于脫脂奶粉,次步略)
(2) 取1ml樣品,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
(3) 50°C恒溫培養3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(4) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH,6 mL 乙酸乙酯,轉速振蕩1min;室溫下4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(7) 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
(8) 室溫下4000g離心10分鐘;
(9) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:2.0
6)血清【迪美唑檢測試劑盒】
(1) 稱取1g血清加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和20µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
(2) 50°C恒溫培養3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(3) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,轉速振蕩1min;
(4) 室溫下4000g離心10分鐘;
(5) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移
取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(6) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(7) 加入1mL1×樣品提取液,劇烈
(8) 振蕩2分鐘;
(9) 室溫下4000g離心10分鐘;
(10) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:2.0
7)尿樣
(1) 取3ml尿樣,4000g離心5min。
(2) 離心后稱取1ml,加入0.5mL1×樣品提取液,3.5mL雙蒸水,0.5mL 1M HCL和40µL 50 mM 2-硝基苯甲醛,劇烈振蕩1分鐘;
(3) 50°C恒溫培養3小時;(說明書后的**標記方法可供選擇)
(4) 加入5mL 0.1 M K2HPO4,0.4 mL 1 M NaOH , 6 mL 乙酸乙酯,轉速振蕩1min;
(5) 室溫下4000g離心10分鐘;
(6) 取3mL上清液(包含了0.5g的原始樣品) 到另一試管(避免觸及下層水相!如果移取液中含有水相,再次4000g離心5分鐘,取上層有機相),在60 -70°C減壓蒸餾或60-70°C氮氣吹干;
(7) 用1 mL 正己烷(或者正庚烷)溶解干燥好的樣品;
(8) 加入1mL1×樣品提取液,劇烈振蕩2分鐘;
(9) 室溫下4000g離心10分鐘;
(10) 每孔取100 µL下清液,進行樣品測試。
稀釋倍數:2.0
檢測步驟
試劑的準備
注意:試劑在使用之前要在室溫下解凍1-2小時,確定在使用前閱讀過注意事項。準備適量的檢測用試劑,所有的試劑搖勻后使用。準備足夠所有小管所需的用量,不能將試劑倒回原來的瓶子中,處理試劑時建議用廢棄的瓶子以降低污染的風險。
1x洗液的制備
1體積的20x洗液同19體積的蒸餾水混合
檢測
\以下為計算份量的表格,用戶可根據自己的需要來確定需要配置多少試劑。
試劑 | 每個反應需要的體積 | 24次反應的體積 |
SEM-HRP | 50 mL | 1.2mL |
1×洗液 | 1mL | 24 mL |
終止液 | 100 mL | 2.4 mL |
底物 | 100 mL | 2.4 mL |
底物 | 100 mL | 2.4 mL |
(1) 加入100mL的標準品于所設定的孔中;
(2) 加入100mL的樣品于所設定的孔中
(3) 在每孔中加入50mL 1×SEM-HRP,輕敲微孔板邊緣混勻1分鐘;
(4) 室溫(22.5±2.5)°C避光孵育30分鐘;
(5) 洗板3次,每次應該加入250mL 1×洗液,*后一次使板盡量甩干并在吸水紙上吸干;
(6) 每孔加入100mL的TMB底物;
(7) 在室溫(22.5±2.5)°C避光孵育20分鐘后,每孔加入100mL的終止液終止反應;
(8) 在450nm或450/650nm下讀OD值 (讀數前,用吸水紙將板底部的指痕和水分擦去,避免影響讀數)。
10.結果計算【迪美唑檢測試劑盒】
(1) 分別計算標準、質控和樣品的平均吸光度值和相對吸光度值。
相對吸光度值 (%) = (標準或樣品吸光度值/零標準吸光度值) ´ 100
(2) 以相對吸光度值為縱坐標,標準濃度為橫坐標建立標準曲線。
(3) 從標準曲線上讀取質控和樣品的濃度值。
(4) 樣品檢測下限計算方法如下:
樣品檢測下限 = (0.025ng/g) ´ (稀釋倍數)
樣品定量下限 = (0.1ng/g) ´ (稀釋倍數)
例如,肉類樣品的稀釋倍數是2.0,那么肉類樣品的檢測下限是0.05ppb,定量檢測下限是0.2ppb。
9238862 #Premium Cover Agreement 9604, 2PM, 1yr The Premium Cover Agreement 9604, 2 PM provides full service coverage for the BioRobot 9604. Costs for service visits are fully covered including travel, labor, and parts. The agreement also includes two annual preventive maintenance visits, with costs for labor and parts covered. With a Full Agreement, there is a priority response time of 24 hours (1 working day). CNY
9241208 QIAsymphony SP, Premium Agreement "Repair service delivery: onsite
Service response time (repair): 24 hours/1 business day
Periodic inspection/maintenance: yes, 1/agreement year
Inspection/maintenance delivery: onsite
Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage
Cost coverage for labor: yes, full coverage
Cost coverage for travel: yes, full coverage
Replacement system (Loaner) provision: not applicable
Transportation cost coverage: not applicable
- QIAsense: QIAsymphony should to be connected to QIAsense for faster download of log files and remote diagostic support." CNY
9241200 QIAxcel, Basic Agreement, no PM "Repair service delivery send to Regional Repair Center
Service response time (repair) 7-10 days turnaround time
Periodic inspection/maintenance: 0
Cost coverage for Repair Parts : yes, full coverage
Cost coverage for labor: yes, full coverage
Cost coverage for travel: yes, full coverage
Replacement system (Loaner) provision: not applicable
Transportation cost coverage: not applicable" CNY
9019468 PLATE GLASS LONG SET GS CNY
9233375 Prssure retaining valve for Washer Mod. CNY
9237348 AdapterPlate, W-Drive, BR8 RD v2.0 CNY
9237329 Upgrade, BR & 3 ext. devices w. sched. Upgrade BioRobot with three approved integration devices using scheduling software CNY 【迪美唑檢測試劑盒】
9237168 Bottle Sheath Supply CNY
9233004 Fan 24V, for BR3000 with VariTerm CNY
9237151 Power Supply CNY
9237123 Upgrade App., QIAquick 96 PCR On-site application Upgrade for standard QIAGEN QIAquick 96 including kit CNY
9237106 Protocol Dev./Opt., on-site (2-days) The QIAGEN BioRobot Systems Protocol Development/Optimization On-Site Visit includes all travel and labor charges for a site visit up to 2 days by a QIAGEN Instrumentation Service Specialist to write and/or opimize protocols for the BioRobot System. Parts, consumable chemistries, and accessories not included. Custom protocols are the sole responsibility of the customer and neither warrantied nor guaranteed. CNY
9237097 Training, BR QIAGEN Advanced A minimum of 4 people are required to attend. The QIAGEN BioRobot Systems Advanced Training includes three days of training at our training facility to introduce users to advanced software topics for the QIAGEN BioRobot Systems. Designed for users with a basic understanding of the use and programming of QIAGEN BioRobot systems who want to write complex protocols for their instrument, the advanced training starts with a brief review of basic concepts such as teaching slots and racks before exploring the higher-level programming features of the QIAsoft Operating System. Topics include the structure and use of functions, using variable for programming flexibility, IF/ELSE/END boolean logic commands, and parameterized pipetting using tables. Users will write, test and run protocols they have developed to demonstrate and reinforce training success. CNY
9236422 Power supply, replacement kit, TWI CNY
9232968 Print YZ96-Adapter-Board Plato-7 CNY
9236363 Reservoir XYP CNY
9236353 Tubing Sample Needle to 3-Way Valve CNY
9236329 2-Way Valve (Sheath or vent) CNY
9236160 Potentionmeter, rotary, kit, RapidPlate CNY
9236154 Online Fill Pump RP CNY
9236126 QIAGEN Multiwell-Plate Holder , silver Holder for accommodating multiwell plates on the Microplate station of the BioRobot MDx worktable CNY
9236120 Runner, Drawer, BR8 RD CNY
9235790 Ramp, Locking, Drawer, BR8 RD CNY 【迪美唑檢測試劑盒】
9230745 Z-Lead screw for Plato 7 CNY
9235690 Cable X-Main, RCS1 CNY
9235572 Shaker Tool, RCS1 CNY
9230314 Cable, RS232, syringe pump, 225mm CNY
9230283 Cable, Interface, X-main to Washer CNY
5000-1302 Capacitor 2UF, SKR1 CNY
5000-1284 DML 2000 - Power Cord, 220V D Type (GB) CNY
5000-1254 Power Supply PCB, DML2 CNY
5000-1250 CPU DML 2000 ASSRY Kit, DML2 CNY
6000-3401 RCS Upgrade Package CNY
QY-x1525 小鼠腎癌細胞RenCa
QY-x1526 小鼠胰島素瘤β細胞(NOD/Lt轉基因小鼠,SV40巨T抗原)NIT-1
QY-x1527 早代小鼠胚胎成纖維細胞MEF
QY-x1528 中國倉鼠肺細胞V79
QY-x1529 兔的肝細胞VX2
QY-x1530 雞胚原代肝細胞CEL
QY-x1531 129小鼠ES細胞D3
QY-x1532 129小鼠ES細胞E14
QY-x1533 BALB/c小鼠ES細胞B/c-ES
QY-x1534 猴的骨髓間充質干細胞MSCS
QY-x1535 SD大鼠骨髓間充質干細胞SDBMSC
QY-x1536 鼠胸腺激酶缺陷細胞株L-MTK
QY-x1537 鼠胚成纖維細胞系STO
QY-x1538 鼠乳腺癌細胞系MA-782 【迪美唑檢測試劑盒】
QY-x1539 鼠成纖維細胞系GR
QY-x1540 雜交瘤細胞枝原體陽性B6YH4
QY-x1541 鼠細胞系B82
QY-x1542 兔腎細胞系RK-13
QY-x1543 猴腎細胞系MA-104
QY-x1544 VERO衍生株SVP
QY-x1545 豬腎細胞系PK-15
QY-x1546 豬腎細胞系IBRS-2
QY-x1547 草魚腎細胞系GIK
QY-x1548 昆蟲細胞系Sf-21
QY-x1549 昆蟲細胞系SF-9
QY-x1550 草魚肝臟細胞L8824
QY-x1551 草魚腎臟細胞CIK
QY-x1552 團頭魴尾鰭細胞WCF
QY-x1553 白鰱尾鰭細胞SCF
QY-x1554 散鱗鏡鯉尾鰭細胞 【迪美唑檢測試劑盒】
QY-x1555 鯉魚尾鰭細胞
QY-x1556 轉化的豚鼠胎體細胞104C1
QY-x1557 中國倉鼠腎細胞(二氫葉酸還原酶缺陷型)CHO/dhFr-