【輸尿管上皮細胞】下面是細胞株培養的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養基完全相同也不可共用培養基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區域內完成，請勿在邊緣非無菌區域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【輸尿管上皮細胞】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養條件

1、培養基：RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【輸尿管上皮細胞】五、培養方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml 培養液繼續培養。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養液培養觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養代理品牌

細胞培養代理品牌

【輸尿管上皮細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9013201  Tubing,release val.auto vac,BR8000 v1.00          CNY                                  

9011704  Cable, PCON98 to AC-box (L1), BR8000            CNY                                  

132603    NeXtal Stock Propylene glycol (50)      100% v/v Propylene glycol - 50mL (4 x 12,5 ml tube) CNY                                  

800302    Heterozygote detection, manual            CNY                                  

132539    NeXtal Stock di-Potassium phosphate (50)   3M di-Potassium hydrogen phosphate - 50mL (4 x 12,5 ml tube)       CNY                                  

132530    NeXtal Stock Cesium sulfate (50) 1M Cesium sulfate - 50mL (4 x 12,5 ml tube)      CNY                                  

337842    qBiomarker SYBR ROX FAST Mastermix (12)           CNY                                  

679923    ipsogen RT Kit (33) CE         CNY                                  

180432    GeneRead DNA Library I Core Kit (12)        CNY                                  

159332    Harris UNI-CORE 6.00 mm Punch Kit (4)          CNY                                  

159134    QIAsafe DNA Blood Tubes (50)           CNY                                  

158567    Gentra Puregene Yeast/Bact. Kit (200 ml)            CNY                                  

33213     Xa Removal Resin (2 x 5ml)  2 x 2.5 ml Xa Removal Resin, 3 x 1.9 ml 1 M Tris-Cl, pH 8.0    CNY                            【輸尿管上皮細胞】   

33203     pQE-30Xa Vector DNA  25 ug pQE-30 Xa Vector DNA      CNY                                  

32915     N-Terminus pQE Vector Set  25 ug each: pQE-9, pQE-30, pQE-31, pQE-32, pQE-40      CNY                                  

31314     Ni-NTA Spin Kit (50)     50 Ni-NTA Spin Columns, Reagents, Buffers, Collection Tubes, 1 ug Control Expression Plasmid       CNY                                  

30950     Glutathione HiCap Matrix  (500 ml)            CNY                                  

30721     Ni-NTA Superflow Cartridges (5x1 ml)        CNY                                  

30230     Ni-NTA Agarose (100 ml)      100 ml nickel-charged resin (max. pressure: 2.8 psi)   CNY                                  

9021219  # LED, 6 µA (12), QX          CNY                                  

9011667  Side panel, technical tower, BR8000            CNY                                  

9240707  Suction Cup Kit, AP              CNY                                  

9240998  QIArent&go - Rent out fee LiquiChip          CNY                                  

676613    ipsogen BAALC ProfileQuant Kit (24)          CNY                                  

676191    ipsogen CBFB-MYH11 D Standards             CNY                                  

9011352  SamTrak positive sample identification         CNY                                  

9011268  Pump, Syringe, Plato 3xxx, (9194)              CNY                                  

330524    RT²  SYBR Green ROX qPCR Mastermix (6)            CNY                                  

871001    KRAS PCR Kit (25)              CNY                            【輸尿管上皮細胞】   

9011266  Syringe Pump Plato 3000 (7135)          CNY                                  

9011216  AC box, BR8000           CNY                                  

9011119   Valve, 3-way, dilutor, BR8000              CNY                                  

9010979  Plate Turntable Olympus PK80 (inc. brd.)           CNY                                  

QTR-1043      全系列大腸桿菌免疫血清OK     G205      1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1044      全系列大腸桿菌免疫血清OK     E65  1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1045      全系列大腸桿菌免疫血清OK     E57  1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1046      全系列大腸桿菌免疫血清OK     E6811     1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1047      全系列大腸桿菌免疫血清OK     E145       1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1048      全系列大腸桿菌免疫血清OK     G1253     1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1049      全系列大腸桿菌免疫血清OK     Abbotstown    1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1050      全系列大腸桿菌免疫血清OK     P16  1ml  玻片凝集試驗                     【輸尿管上皮細胞】

QTR-1051      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V142       1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1052      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V189       1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1053      全系列大腸桿菌免疫血清OK     E4   1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1054      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V17 1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1055      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V50 1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1056      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V79 1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1057      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V165       1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1058      全系列大腸桿菌免疫血清OK     V113       1ml  玻片凝集試驗                    

QTR-1059      全系列大腸桿菌免疫血清K91    1ml  玻片凝集試驗                           

QTR-1060      全系列大腸桿菌免疫血清K89    1ml  玻片凝集試驗                           

QTR-1061      全系列大腸桿菌免疫血清K103  1ml  玻片凝集試驗                           

QTR-1062      全系列大腸桿菌免疫血清K87    1ml  玻片凝集試驗                           

QTR-1063      腸產毒性大腸桿菌診斷試劑盒    60    乳膠凝集試驗                           

QTR-1064      腸產毒性大腸桿菌診斷試劑盒    60    乳膠凝集試驗                           

QTR-1065      腸產毒性大腸桿菌診斷試劑盒    60    乳膠凝集試驗                           

QTR-1066      腸產毒性大腸桿菌診斷試劑盒    60    乳膠凝集試驗                            【輸尿管上皮細胞】

QTR-1067      禽流感病毒H5N3分型抗原 1ml  血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1068      禽流感病毒H5N1分型抗原 1ml  血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1069      禽流感病毒H5N2分型抗原 1ml  血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1070      禽流感病毒H7N2分型抗原 1ml  血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1071      禽流感病毒H7N7分型抗原 1ml  血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1072      禽流感病毒H5N1分型血清 0.5ml      血凝試驗/凝集抑制試驗                          

QTR-1073      禽流感病毒H5N2分型血清 0.5ml      血凝試驗/凝集抑制試驗