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【腸微血管內皮細胞】下面是細胞株培養的具體無菌技術要點：
1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養基完全相同也不可共用培養基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區域內完成，請勿在邊緣非無菌區域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目：
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。
5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。
6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。
【腸微血管內皮細胞】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！
一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書
二、客戶自備試劑
1、PBS
2、 2、RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
3、0.25% （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）
三、細胞背景
1、生長方式：貼壁
2、種屬：Homo sapiens 人
四、培養條件
1、培養基：RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗
2、溫度：37.0°C
3、氣體:空氣 95%，CO2 5%
【腸微血管內皮細胞】五、培養方法
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml 培養液繼續培養。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：
1，棄去培養液，用PBS洗 1-2次。
2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml 含 10%血清的培養液，輕輕吹打細胞。
3，加入等量的的培養液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養
4，傳代比例：1:2-1:3
七、常見問題及解決方案
1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2、細胞漂�。号囵B瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養液培養觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
細胞培養代理品牌
| | BD 產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學和蛋白質組學等諸多領域，旗下擁有Clontech 、Discovery labware 、Pharmingen 、Falcon 等質品牌，值得稱贊的是每一個品牌在其所在的領域都是其中的佼佼者。 |
細胞培養代理品牌
| | GIBCO 作為細胞培養的金字招牌，是在此領域的領導者，現在是Invitrogen的一部分。Gibco可以提供*為廣泛的品種以滿足用戶不同的需求，每一種產品都通過*為嚴格的品質管理。同時，Gibco也可按客戶的要求對培養基的配方進行改動，或完全按客戶的配方進行生產。 |
【腸微血管內皮細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com
9022123 Tool, Filter barrel insertion, RGQ CNY
9022118 Notebook_V2 XP CNY
9022023 Kit, transport Z-axis sensor upgrade, QX CNY
9238560 Upgrade App., MagAttract 96 Plant CNY
204974 Rotor-Gene Multiplex RT-PCR Kit (400) CNY
204852 QuantiFast Multiplex RT-PCR Kit (80) CNY
204757 QuantiFast Multiplex PCR +R Kit (4000) CNY 【腸微血管內皮細胞】
133179 NeXtalStock Citric acid pH 2.8 (200) CNY
9015383 Unit, door lock, M96 CNY
9001794 QIAcube HT/QIAxtractor, platform CNY
9012340 Side panel, robot arm CNY
1068337 Carrier RNA (Poly rA) (310µl) CNY
38041 GNA Cartridge (1ml) CNY
9015379 Holder, plate, with spring, M96 CNY
9015368 Filters, dust, M96 (2) CNY
9015364 Nozzles, M96 (8) CNY
133157 NeXtalStock BIS-TRIS Propane pH9.5 (100) CNY
133150 NeXtalStock BIS-TRIS pH 5.5 (100) CNY
133073 NeXtalStock Pentaerythritol prop.(200) CNY
133065 NeXtalStock Malonic acid sod. salt (200) CNY
133055 NeXtalStock Lithium acetate (200) CNY
805925 REPLI-g Service, Single Tube (500 µg) CNY
133041 NeXtalStock di-Sodium tartrate (200) CNY 【腸微血管內皮細胞】
9001672 PyroMark Q96 ID Instrument complete For performing pyrosequencing reaction on the Q96 ID CNY
951438 MagAttract DNA Blood M96 Kit (960) MagAttract Suspension ａnd reagents for purification of genomic DNA from blood using the BioRobot M96 workstation CNY
9015334 Board, HC2 CNY
133031 NeXtalStock CHES untit. (200) CNY
133024 NeXtalStock Cadmium sulfate (200) CNY
9001610 QIAgility (incl.Laptop) CNY
9001570 Rotor-Gene Q 5plex Platform CNY
9015320 Belt, Z-motor, M48 CNY
9015315 Belt, X-iming, M48 CNY
9015310 Unit, door lock, M48 CNY
QPH00177 Recombinant Human VEGF165 Peprotech 10ug/1mg/
QPH00178 Recombinant Human VEGF165 Peprotech 2ug/10ug/
QPH00179 Recombinant Murine VEGF Peprotech 2ug/10ug/
QPH00180 Recombinant Human EPO Prospec 5ug/50ug
QPH00181 Recombinant Human HGH Prospec
QPH00182 Recombinant Human IFN-α2a Prospec 20ug/100ug/
QPH00183 Recombinant Human IFN-α2b Prospec 20ug/100ug/
QPH00184 PeproGrow- hESC 胚胎干細胞培養基 500ml
QPH00185 PeproGrow-hESC 胚胎干細胞培養基 100ml
QPH00186 人樹突狀細胞培養試劑盒 (HDC) 1pack
QPH00187 小鼠樹突狀細胞培養試劑盒(MDC) 1pack
QPH00188 人樹突狀細胞（Dendritic cells, DC）培養用細胞因子套裝(無動物成分) 1pack
QPH00189 小鼠樹突狀細胞培養用細胞因子套裝(無動物成分) 1pack
QPH00190 人造血干細胞擴增試劑盒 (HHSC3) 1pack 【腸微血管內皮細胞】
QPH00191 小鼠造血干細胞擴增試劑盒 (MHSC3) 1pack
QPH00192 人造血干細胞擴增試劑盒(HHSC6) 1pack
QPH00193 小鼠造血干細胞擴增試劑盒(MHSC6) 1pack
QPH00194 人造血干細胞擴增用細胞因子套裝(IL-6)(無動物成分) 1pack
QPH00195 人造血干細胞擴增用細胞因子套裝(IL-3)(無動物成分) 1pack
QPH00196 正常小鼠IgG 1000ug
QPH00197 正常兔IgG 500ug
QPH00198 正常山羊IgG 1mg
QPH00199 (BioGems)重組人轉鐵蛋白 10g
QPH00200 PeproGrow-1無血清細胞培養添加物試劑盒 (培養HEK-293，HeLa和A549細胞)
QPH00201 脂類混合溶液 (配11L無血清培養液)
QPH00202 血清替代物溶液 (配10L無血清培養液)
QPH00203 (BioGems)重組人轉鐵蛋白 1g
QPH00204 (BioGems)重組人胰島素 1g
QPH00205 (BioGems)重組人胰島素 5g
QPH00206 血清替代物溶液II 【腸微血管內皮細胞】
QYBS6221 沙門氏菌屬診斷血清60種 1ml×60瓶
r�����h��i
α-突觸核蛋白, 96-140 Alpha-Synuclein, 96-140 0.5mg
α-突觸核蛋白, A53T突變體 Alpha-Synuclein, A53T mutant 0.5mg
α-突觸核蛋白, A53T突變體 Alpha-Synuclein, A53T mutant 1.0mg
α-突觸核蛋白, A30P突變體 Alpha-Synuclein, A30P mutant 0.5mg
α-突觸核蛋白, A30P突變體 Alpha-Synuclein, A30P mutant 1.0mg 【臍動脈平滑肌細胞】
α-突觸核蛋白 A30P, A53T突變體 Alpha-Synuclein, A30P, A53T mutant 0.5mg
α-突觸核蛋白 A30P, A53T突變體 Alpha-Synuclein, A30P, A53T mutant 1.0mg
α-突觸核蛋白, E46K突變體 Alpha-Synuclein, E46K mutant 0.5mg
α-突觸核蛋白, E46K突變體 Alpha-Synuclein, E46K mutant 1.0mg
＇fon.� ml��h��iTimes New Roman";Times New Roman"＇>盒
QYH20 生長激素（hGH）檢測試劑盒（血清） Growth Hormone (hGH) 96孔/盒
QYH21 胰島素樣生長因子結合蛋白1（IGFBP-1）檢測試劑盒（血清） Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-1 (IGFBP-1) 96孔/盒
QYH22 促黃體生成素（hLH）檢測試劑盒（血清） Luteinizing Hormone (hLH) 96孔/盒
QYH23 瘦素檢測試劑盒（血清） Leptin 96孔/盒 【臍靜脈平滑肌細胞】
QYH24 卵巢癌（CA125）檢測試劑盒（血清） Ovarian Cancer (CA125) 96孔/盒
QYH25 孕烯醇酮檢測試劑盒（血清） Pregnenolone 96孔/盒
QYH26 孕酮檢測試劑盒（血清） Progesterone 96孔/盒
QYH27 孕酮（唾液）檢測試劑盒 Progesterone Saliva 96孔/盒
QYH28 催乳素檢測試劑盒（血清） Prolactin 96孔/盒
