【膠質瘤組織源性原代細胞】下面是細胞株培養的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養基完全相同也不可共用培養基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區域內完成，請勿在邊緣非無菌區域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【膠質瘤組織源性原代細胞】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養條件

1、培養基：RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【膠質瘤組織源性原代細胞】五、培養方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml 培養液繼續培養。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養液培養觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養代理品牌

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【膠質瘤組織源性原代細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

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9019022  Worktable cover, EZ1xl         CNY                            【膠質瘤組織源性原代細胞】   

9018999  Cover, front, bottom, EZ1xl          CNY                                  

9018958  Master Mix Block, 1x5ml, 4x1.5ml Tubes           CNY                                  

9018939  Adapter, LightCycler 96 Capillary Rack        CNY                                  

9022709  Plate, Lumicheck Actuator, DML3000         CNY                                  

9015786  Teaching Tool Samtrack        CNY                                  

9015538  Worktable, complete             CNY                                  

9015532  Cover, back, type B              CNY                                  

9015526  Board, motor driver              CNY                                  

QYD709  孔雀石綠ELISA定量檢測試劑盒       用于檢測飼料、水產品等，適用于大型水產公司，農產品檢測中心等                                  

QYD710  金霉素ELISA定量檢測試劑盒   用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD711  泰樂菌素、替米考星ELISA定量檢測試劑盒   動物（豬雞）組織（肌肉、肝臟）                               

QYD712  沙門、志賀氏菌核酸檢測試劑盒       食品安全PCR檢測                                 

QYD713  四環素類藥物（四合一）ELISA定量檢測試劑盒    動物組織、飼料、尿液、雞蛋、牛奶、蜂蜜                               

QYD714  萊克多巴胺（RAC）快速檢測卡       用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD715  克倫特羅（CL）快速檢測卡      用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD716  沙丁胺醇快速檢測卡    用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD717  氯霉素（CAP）快速檢測卡 用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD718  喹諾酮類（QNS）快速檢測卡    用于檢測飼料、蜂蜜、牛奶、水產品、各種動物肉組織，包括雞鴨鵝等，適用于屠宰場，動物防疫站/監督所，農產品檢測中心，大型肉食品加工企業等                              

QYD719  農藥殘留快速檢測卡    用于檢蔬菜、水果等，適用于大型農貿市場、農業局、農產品檢測中心等                                  

QYD720  青霉素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                   【膠質瘤組織源性原代細胞】

QYD721  四環素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD722  鏈霉素殘留快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD723  慶大霉素殘留快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD724  新霉素快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD725  紅霉素快速檢測卡       牛奶、蜂蜜等                                  

QYD726  泰樂菌素快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD727  頭孢菌素快速檢測卡    牛奶、蜂蜜等                                  

QYD728  孔雀石綠快速檢測卡    用于檢測飼料、水產品等，適用于大型水產公司，農產品檢測中心等                                  

QYD729  β-內酰胺類快速檢測卡      牛奶、蜂蜜等                                  

QYD730  黃曲霉B1檢測卡 飼料、豆類、麥類、谷類；醬油                                  

QP1011   豬瘟抗體金標快速檢測卡  CSFV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1012   豬口蹄疫抗體金標快速檢測卡 FMDV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1013   豬偽狂犬病抗體金標快速檢測卡 PRV Antibody Rapid test kit 全血、血清    50T/盒                        

QP1014   豬藍耳病抗體金標檢快速測卡 PRRSV Antibody Rapid test kit       全血、血清    50T/盒                        

QP1015   豬園環病毒病抗體金標快速檢測卡 PCV-2 Antibody Rapid test kit  全血、血清    50T/盒                        

QP1016   豬瘟病毒抗原金標檢快速測卡 CSFV Antigen Rapid test kit    全血、血清    50T/盒                         【膠質瘤組織源性原代細胞】

QP1017   犬瘟熱抗原金標檢測快速卡 CDV Antigen Rapid test kit  分泌物、血清       50T/盒                        

QP1018   犬細小病毒抗原金標快速檢測卡 CPV Antigen Rapid test kit   糞便       50T/盒                        

QP1019   禽流感病毒抗原金標快速檢測卡AIV Antigen Rapid test kit     眼、氣管、肛門分泌物       50T/盒                        

QYD707  呋喃妥因殘留標示物ELISA定量檢測試劑盒 用于檢測飼料、水產品等，適用于大型水產公司，農產品檢測中心等                 

QYD708  呋喃它酮殘留標示物ELISA定量檢測試劑盒 用于檢測飼料、水產品等，適用于大型水產公司，農產品檢測中心等                 

QYD672  二聯快速檢測試紙條    20份/盒  13.5元/份  30元/份                         【宮頸癌組織源性原代細胞】

QYD673  牛結核病抗體檢測試劑盒    Elisa 2*96孔                       

QYD674  荷蘭賽迪口蹄疫0型2板試劑盒 Elisa 2*96孔                       

QYD675  口蹄疫非結構蛋白抗體檢測試劑盒    Elisa 5*96孔                       

QYD676  豬瘟抗原2板檢測試劑盒    Elisa 2*96孔                       

QYD677  偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒    Elisa 5*96孔                       

QYD201  雞傳染性喉氣管炎抗體檢測試劑盒    96孔/盒