【氣管上皮細胞】下面是細胞株培養的具體無菌技術要點：

1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養基完全相同也不可共用培養基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。

2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的中央無菌區域內完成，請勿在邊緣非無菌區域進行操作。

3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。

4. 工作人員應當首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。

5. 定期檢測下列項目：

5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力

5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。

5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000小時/HEPA）。

6. 水槽內可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。

【氣管上皮細胞】齊一生物友情提醒，本產品僅供科研使用，不得用于臨床及診斷使用！

一細胞說明，具體詳細請見細胞附帶說明書

 二、客戶自備試劑

1、PBS  

2、 2、RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

3、0.25%  （W/V）胰蛋白酶（含 0.02% EDTA）

三、細胞背景

1、生長方式：貼壁

2、種屬：Homo sapiens  人

四、培養條件

1、培養基：RPMI-1640 培養基（不含 Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%雙抗

2、溫度：37.0°C

3、氣體:空氣  95%，CO2 5%

【氣管上皮細胞】五、培養方法

 收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：

 如果細胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，留10ml 培養液繼續培養。如果細胞已長滿（達 80-90%）。即可進行傳代，具六、體步驟如下：

1，棄去培養液，用PBS洗 1-2次。

2，向瓶內加入 1.0-2.0ml 胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有 6ml  含 10%血清的培養液，輕輕吹打細胞。

3，加入等量的的培養液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養

4，傳代比例：1:2-1:3  

七、常見問題及解決方案

1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2、細胞漂�。号囵B瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養液培養觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

細胞培養代理品牌

細胞培養代理品牌

【氣管上皮細胞】齊一生物科技（上海）有限公司是一家專業生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司. 齊一生物銷售：021－6034 8496；181214 53965；173021 04490；Web:www.qiyibio.com

9020062  Brake 205V DC, TLyser        CNY                                  

9020055  Motor 100-115V 50/60 Hz, TLyser              CNY                                  

9020053  Motor 220-240V 50/60 Hz, TLyser              CNY                                  

9014868  Motor, W-Drive, BR8RD              CNY                                  

9014776  PC98, BR8 RD v1.0             CNY                                  

9014645  System Reagent Trough Lids (Qty 4)          CNY                                  

9014563  Base Plate, Robovac, BR8 RD v4.2             CNY                                  

9014515  Pulley Overhead, BR8, RD v1.0           CNY                            【氣管上皮細胞】      

9022598  Cover, VELA, RGQ              CNY                                  

9022474  Shipment Box, careHPV        CNY                                  

9022183  LC-Display incl. Backlight            CNY                                  

9022124  Tool, fluorescent bead 72well rotor, RGQ           CNY                                  

9238616  Buffer 20/30, Zent3              CNY                                  

9238476  Compression ring caps, RapidPlate              CNY                                  

9238421  Installation, BR, Standard Solution        CNY                                  

9238244  User Manual BR EZ1            CNY                                  

9237924  Meter, Tension, Sonic, 507C         CNY                                  

9240659  Rebuild Kit, Pump, Jun-Air, AP            CNY                                  

9240650  Cable, Barcode, Keyence BL601, AP196/98         CNY                                  

9240648  Cable, Barcode, MS-3 CCD, AP196/98        CNY                                  

9240645  External BCR, Metrologic, MS6720, AP              CNY                                  

9240627  Fuse, 10amp, 5 X 20 mm, AP196/98           CNY                                  

9240620  Relay, DPST 24VCD, AP96          CNY                                  

9240595  MAC Valve, Manifold, Vacuum, AP98          CNY                            【氣管上皮細胞】      

9240592  Unload Valve, Vacuum Pump, AP196/98              CNY                                  

9240565  Fan, Motor, 230V, Eppendorf AP196/98              CNY                                  

9240555  Motor Cover, Rubber, Eppendorf, AP196/98        CNY                                  

9240510  Cable Kit, PC104, AP196/98         CNY                                  

9240501  PM Kit, AP98         CNY                                  

9240372  QIASymphony SP, Installation      The Installation, QIAsymphony SP facilitates the quick implementation of the QIAsymphony into the lab routine by minimizing the instrument start-up phase. It covers the hardware ａnd software installation of the QIAsymphony instrument ａnd provides the user with an introductory training. The installation includes or labor ａnd travel costs. The performance of the installation process is documented on a GMP/GLP-compliant Field Service document.    CNY                                  

9239960  Upgrade App., BR MDx DSP Tube-Ring PCR             CNY                                  

9239850  Adapter, XYP to LC200         CNY                                  

9019943  Cable, P-axis ribbon, 8 ch. , CX1         CNY                                  

QY-x1380       小鼠白血病克隆細胞系L6565                                      

QY-x1381       小鼠白血病細胞G-CSF依賴性NFS-60                                       

QY-x1382       小鼠肥大細胞癌細胞P815                                     

QY-x1383       小鼠肺癌細胞Lewis                                       

QY-x1384       小鼠肺癌細胞LLC                                         

QY-x1385       小鼠胃癌細胞MFC                                        

QY-x1386       小鼠艾氏腹水癌細胞EAC                                     

QY-x1387       小鼠腹水瘤細胞SAC-II B2                                    

QY-x1388       小鼠腹水瘤細胞SAC-II C3                                    

QY-x1389       小鼠乳腺癌高轉移細胞MA-891                                    

QY-x1390       小鼠乳腺腫瘤細胞C127                                        

QY-x1391       大鼠乳腺癌細胞SHZ-88                                        

QY-x1392       小鼠骨髓瘤細胞SP2/0                                   

QY-x1393       鼠骨髓瘤細胞SP2/0-Ag14                                     

QY-x1394       小鼠骨髓瘤細胞P3-X63-Ag8.653                                          【氣管上皮細胞】

QY-x1395       小鼠骨髓瘤細胞P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]                                       

QY-x1396       小鼠骨髓瘤細胞FO                                       

QY-x1397       小鼠淋巴瘤細胞Yac-1                                    

QY-x1398       小鼠淋巴瘤細胞EL4                                      

QY-x1399       小鼠淋巴瘤細胞EL4.IL-2                                      

QY-x1400       小鼠黑色素瘤細胞B16F1                                      

QY-x1401       鼠黑色素瘤細胞系B16-Fo                                     

QY-x1402       小鼠黑色素瘤高轉移細胞B16F10                                        

QY-x1403       小鼠黑色素瘤細胞B16BL6                                    

QY-x1404       小鼠黑色素瘤細胞B16                                   

QY-x1405       小鼠SRSV轉化的3T3細胞SRSV/3T3                                       

QY-x1406       小鼠胚胎成纖維細胞BALB/3T3 clone A31                                   

QY-x1407       小鼠肝癌細胞H22                                   

QY-x1408       小鼠肝癌細胞Hepa 1-6                                   

QY-x1409       大鼠肝癌細胞CBRH-7919                                     

QY-x1410       大鼠肝癌細胞RH-35                                       【氣管上皮細胞】