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ELISA試劑盒固相載體詳解-齊一生物
點擊次數：194 發布時間：2016/8/11 10:47:28
ELISA試劑盒固相載體
固相載體在 ELISA 測定過程中作為吸附劑和容器，
不參與化學反應�？勺� ELISA 中載體的材 料很多，*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能，抗體或蛋白質抗原 吸附其上后仍保留原來的免疫學活性，加之它的價格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑 料，可制成各種形式。 ELISA 載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板*為常用，專用 于 EILSA 的產品稱為 ELISA 板，上標準的微量滴定板為 8×12 的 96 孔式。為便于作少 量標本的檢測，有制成 8 聯孔條或 12 聯孔條的，放入座架后，大小與標準ELISA 板相同。
ELISA 板的特點是可以同時進行大量標本的檢測，并可在特制的比色計上迅速讀出結果�，F 在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的 ELISA 檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步 驟，對操作的標準化極為有利。聚苯乙烯經射線照射后，其吸附性能特別是對免疫球蛋白的 吸附性能增加，應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多，但用于間接法測抗體時空白值 較大。 良好的 ELISA 板應該是吸附性能好， 空白值低，孔底透明度高，各板之間、 同一板各孔之間、 同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯 ELISA 板由于原料的不同和制作工藝的差別，各種產品 的質量差異很大，因此，每一批號的 ELISA 板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法 為：以一定濃度的人 IgG（一般為 10ng/ml）包被 ELISA 板各孔，洗滌后每孔內加入適當稀 釋度的酶標抗人 IgG 抗體，保溫后洗滌，加底物顯色，終止酶反應后，分別測每孔溶液的吸 光度�？刂品磻獥l件，使各孔讀數在吸光度 0.8 左右。計算全部讀數的平均值。所有單個讀 數與全部讀數的均數之差，應小于 10%。 與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為 ELISA 固相載體，聚氯乙烯的特點為質軟板薄，可 剪割，價廉，但光潔度不如聚苯乙烯板，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質的吸 附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。 為比較不同固相在某一 ELISA 測定中的優劣，
ELISA試劑盒可應用如下的試驗：
用其他免疫學測定方法選 出一個典型的陽性標本和陰性標本，將它們進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預定 的 ELISA 操作步驟進行測定， 然后比較結果。 在哪一種載體上陽性結果與陰性結果差別， 這種載體就是這一 ELISA 測定項目的*合適的固相載體。 在 ELISA 中， 用作固相載體的小珠一般為直徑 0.6cm 的圓珠，表面經磨砂處理后吸附面積大 大增加。ELISA 板孔的吸附面積約為 200mm2，小珠均為 1000mm2，將近 ELISA 板孔的 5 倍。 吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。 再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸 附的抗原決定簇或抗體結合位點的暴露面處于*佳反應狀態， 因此珠式 ELISA 的反應往往更 為靈敏。小珠的另一特點是更易于使洗滌徹底，使用特殊的洗滌器，使小珠在洗滌過程中滾 動淋洗，其洗滌效果遠較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大，小珠的均一性較 差。 小試管作為固相載體也有較大的吸附表面，而且標本的反應量也相應增加。板式及珠式 ELISA 的標本量一般為 100-200ul，而小試管可根據需要加大反應體積，標本反應量的增加 有助于試驗敏感性的提高。小試管還可以當作比色杯，*后直接放入分光光度計中比色。 也有應用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為 ELISA 固相載體的。其優點是表面積極 大，反應在懸液中進行，其速率與液相反應近似。以含鐵的磁性微粒作為 ELISA 固相載體， 反應后用磁鐵的吸引進行分離，洗滌方便，試劑盒一般均配以特殊儀器。
固相載體在 ELISA 測定過程中作為吸附劑和容器，
不參與化學反應�？勺� ELISA 中載體的材 料很多，*常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的性能，抗體或蛋白質抗原 吸附其上后仍保留原來的免疫學活性，加之它的價格低廉，所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑 料，可制成各種形式。 ELISA 載體的形狀主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板*為常用，專用 于 EILSA 的產品稱為 ELISA 板，上標準的微量滴定板為 8×12 的 96 孔式。為便于作少 量標本的檢測，有制成 8 聯孔條或 12 聯孔條的，放入座架后，大小與標準ELISA 板相同。
ELISA 板的特點是可以同時進行大量標本的檢測，并可在特制的比色計上迅速讀出結果�，F 在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的 ELISA 檢測，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步 驟，對操作的標準化極為有利。聚苯乙烯經射線照射后，其吸附性能特別是對免疫球蛋白的 吸附性能增加，應用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多，但用于間接法測抗體時空白值 較大。 良好的 ELISA 板應該是吸附性能好， 空白值低，孔底透明度高，各板之間、 同一板各孔之間、 同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯 ELISA 板由于原料的不同和制作工藝的差別，各種產品 的質量差異很大，因此，每一批號的 ELISA 板在使用前須事先檢查其性能。常用的檢查方法 為：以一定濃度的人 IgG（一般為 10ng/ml）包被 ELISA 板各孔，洗滌后每孔內加入適當稀 釋度的酶標抗人 IgG 抗體，保溫后洗滌，加底物顯色，終止酶反應后，分別測每孔溶液的吸 光度�？刂品磻獥l件，使各孔讀數在吸光度 0.8 左右。計算全部讀數的平均值。所有單個讀 數與全部讀數的均數之差，應小于 10%。 與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為 ELISA 固相載體，聚氯乙烯的特點為質軟板薄，可 剪割，價廉，但光潔度不如聚苯乙烯板，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質的吸 附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。 為比較不同固相在某一 ELISA 測定中的優劣，
ELISA試劑盒可應用如下的試驗：
用其他免疫學測定方法選 出一個典型的陽性標本和陰性標本，將它們進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預定 的 ELISA 操作步驟進行測定， 然后比較結果。 在哪一種載體上陽性結果與陰性結果差別， 這種載體就是這一 ELISA 測定項目的*合適的固相載體。 在 ELISA 中， 用作固相載體的小珠一般為直徑 0.6cm 的圓珠，表面經磨砂處理后吸附面積大 大增加。ELISA 板孔的吸附面積約為 200mm2，小珠均為 1000mm2，將近 ELISA 板孔的 5 倍。 吸附面積的增大即意味著固相抗原或抗體量的增加。 再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸 附的抗原決定簇或抗體結合位點的暴露面處于*佳反應狀態， 因此珠式 ELISA 的反應往往更 為靈敏。小珠的另一特點是更易于使洗滌徹底，使用特殊的洗滌器，使小珠在洗滌過程中滾 動淋洗，其洗滌效果遠較板孔的浸泡式為好。但由于磨砂工藝的難度較大，小珠的均一性較 差。 小試管作為固相載體也有較大的吸附表面，而且標本的反應量也相應增加。板式及珠式 ELISA 的標本量一般為 100-200ul，而小試管可根據需要加大反應體積，標本反應量的增加 有助于試驗敏感性的提高。小試管還可以當作比色杯，*后直接放入分光光度計中比色。 也有應用聚苯乙烯膠乳或其他材料制成的微粒作為 ELISA 固相載體的。其優點是表面積極 大，反應在懸液中進行，其速率與液相反應近似。以含鐵的磁性微粒作為 ELISA 固相載體， 反應后用磁鐵的吸引進行分離，洗滌方便，試劑盒一般均配以特殊儀器。
齊一生物科技（上海）有限公司，專業從事生物產品研發、生產、經營為一體的專業化生物工程技術公司！為廣大科研工作者、企業和學校提供質優價廉的實驗室用品，本公司主要經營ELISA酶聯免疫檢測試劑盒、進口原裝ELISA試劑盒、分子生物學檢測試劑盒、免疫學檢測試劑盒、各品牌原裝進口抗體抗原、細胞菌株、生物培養基、生化試劑、實驗耗材等多門類上萬余種科研試劑產品！產品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域！已迅速發展成為國內科學試劑的運營商，是國家重點實驗室指定供應商，并與國內多家科研單位緊密合作。產品已被中國科學家使用后在期刊<Cell>、<Nature>、<PNAS>、<Immunity>等上發表文章數超1000篇。
原創作者：齊一生物科技（上海）有限公司
