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Covalab丨艾美捷 駱駝血VHH碎片解決方案
點擊次數:0發布時間:2023/6/2 17:02:19
更新日期:2023/6/2 17:02:19
所 在 地:中國大陸
產品型號:
優質供應
詳細內容
這些抗體僅由兩條沒有CH1區域的重鏈和在其N末端的抗原結合域(稱為VHH)組成。
hcIgG的獨特之處在于其單體抗原結合區(VHH)能夠結合具有特異性、親和力,尤其是多樣性的抗原,與傳統抗體相當,而無需與其他區域配對。使用分子工程可以產生VHH碎屑。
為什么要使用艾美捷Covalab VHH片段?
結合隱藏的表位:
它們的空間位阻減少,使它們能夠到達傳統抗體無法獲得的難以獲得的抗原,例如酶的活性位點(有助于抑制酶活性)以及較小的酶,例如溶菌酶或核糖核酸酶。
更好的滲透性:
與傳統抗體相比,它們穿透組織的能力增強,在進行免疫組織化學時可以更精確地對組織切片進行染色。
更穩定:
VHH區域的高再折疊能力使它們在熱力學上更加穩定,并能抵抗高溫(高達70°C / 158°F)和端pH值,如胃酸。
Covalab艾美捷丨VHH開發:
1-駱駝免疫接種
免疫:
根據Covalab的 88 天方案,免疫步驟包括 4 次注射和 2 次測試出血。
監測:
免疫反應性通過為該項目開發的檢測方法進行監測。
2-噬菌體文庫構建
PBMCs分離和RNA提。
從終出血中分離外周血單核細胞(PBMC)并提取總RNA。
cDNA合成和VHH擴增:
RT-PCR 和 VHH 抗體片段擴增
特異性引物設計用于在VHH編碼區域內進行逆轉錄,第二次嵌套PCR允許cDNA擴增。
噬菌體載體克。
VHH編碼基因被整合到噬菌體載體中,然后用于轉化感受態細菌以產生噬菌體文庫。
3-平移
目標交互:
將抗原固定在微量滴定板孔的底部,將噬菌體制劑加載到孔中,使其通過在其表面表達的VHH結合抗原。
放大:
洗掉未結合的噬菌體后,剩余的噬菌體被轉導成感受態細菌進行富集和擴增。
選擇:
在每個淘選階段結束時,分離編碼抗原特異性VHH的cDNA
4- 生產和凈化
表達載體中的亞克。
插入片段被整合到表達載體中,然后用于轉化感受態細菌。
培養、裂解和親和色譜純化:
通過親和色譜從培養物上清液中純化特異性VHH。
所有編碼特定VHH的cDNA都保存在我們的實驗室中。
Covalab注于抗體研發域,涵蓋抗體和試劑盒。擁有多種針對流行和罕見靶標的一抗,涉及多種應用域,如癌癥,表觀遺傳學,細胞信號傳導,心血管等疾病的生物標志物,神經系統,離子通道,微生物學,病毒學等。還有特色的應用于模式動物斑馬魚的抗體。此外還有各種ELISA試劑盒,ELISPot試劑盒,FluoroSpot試劑盒等。艾美捷科技是Covalab的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。