艾美捷POLYMAG CRISPR 200 轉染試劑#PNC40200特點：

• 即使在原代細胞和難以轉染的細胞上也能高效遞送 CRISPR/Cas9 系統

• 非常適合共轉染 pDNA/pDNA、pDNA/gRNA、pDNA/mRNA

• 針對含有 Cas9 的大質粒 DNA 進行了優化，并引導 RNA

• 低細胞毒性 - 能夠以更少的細胞開始實驗

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儲存： +4°C

運輸條件：室溫

POLYMAG CRISPR 200 轉染試劑細胞制備：

建議在轉染一天對細胞進行種子接種或平板接種。合適的細胞密度將取決于生長速率和細胞條件。細胞應在磁化時間。對于懸浮細胞，使用給定的特定方案在下面在轉染之，可以用新鮮培養基代替培養基（可選不含血清）。

強烈建議您優化轉染條件，以充分利用磁轉染ä. 可以優化幾個參數：

•使用的核酸劑量

•PolyMag CRISPR與核酸的比例

•細胞密度

•培養時間

1.先優化PolyMag CRISPR/DNA的比例。為此，使用固定數量的DNA。變化PolyMag CRISPR的量為0.25至5m升/mg的DNA。PolyMag CRISPR/DNA的比例可以通過將所使用的試劑的體積加倍或相乘來改變。試劑可以是在去離子水中預先稀釋。

2.此后，以固定比例的PolyMag CRISPR/DNA改變核酸劑量之進行了優化。為此，您可以對預成型的磁矢量復合體。

3.也可以研究每個質粒的化學計量：改變每個質粒的比例整個混合物中的DNA。

4.在確定了正確數量的PolyMag CRISPR和核酸后，您可以通過優化復合體的細胞數量和孵育時間來實現這一過程形成和用于磁場應用。

來源：https://www.amyjet.com/products/OZB-PNC40200.shtml