比色檢測是種經濟、簡便的Western印跡檢測分析物的方法。與二抗偶聯的酶報告基因與顯色底物發生反應，產生視覺上可檢測的信號，從而直接在印跡膜上識別目的蛋白的存在。

這期的主題是Jackson ImmunoResearch公司為大家講解：Western Blot、IHC 和 ELISA 的顯色檢測。

具有比色檢測的蛋白質印跡使用與酶報告分子偶聯的二抗，該酶報告分子催化可溶性顯色底物轉化為有色不溶性產物。該產物沉淀在印跡膜上，產生肉眼可見的彩色條帶，從而識別出感興趣的蛋白質。

Jackson公司比色信號檢測是種用于般實驗室的有用方法，設置成本低，因為不需要特殊設備來可視化信號。

圖 1：間接比色檢測。A. 酶聯二抗與目的蛋白的抗結合。B. 將底物添加到抗體-抗原復合物中。C. 酶與底物反應，形成可檢測的有色產物。

、Jackson公司：開發印跡很簡單

將膜與顯色底物起溫育，直到產生所需水平的信號，然后簡單地將底物洗掉。這會停止酶促反應并阻止印跡進步發展。比色檢測操作簡單快捷，與化學發光或熒光系統相比，為優化提供了更大的靈活性。然而，固定的沉淀物不利于膜的剝離和重新探測，使得使用額外抗體的多次探測不可靠。

比色 Western blotting 可以具有高靈敏度，但長時間孵育會導致背景信號增加，這可能會掩蓋來自感興趣蛋白質的信號。因此，比色檢測可能不適用于低豐度蛋白質。然而，當已知蛋白質豐富或方法已優化時，簡單性和低成本使得比色檢測具有吸引力。有多種底物可用，它們會產生系列有色沉淀物，每種都提供不同的靈敏度。

圖 2：比色西方印跡。通過 SDS-PAGE 分離還原的和 SDS 變性的小鼠 IgG 的重鏈 (HC 50 kDa) 和輕鏈 (LC 25 kDa)，并使用過氧化物酶-山羊抗小鼠 IgG (H+L) 在蛋白質印跡上檢測并用 TMB 可視化顯色底物。

Jackson公司注于親和純化的二抗和純化免疫球蛋白研究，服務域覆蓋各大學科研所和醫院里的動物研究以及生物醫學研究機構的科學家。艾美捷科技是Jackson公司的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。

來源：https://www.amyjet.com/brand/jackson-china-distributor.shtml