CYTO-ID ®自噬檢測試劑盒 2.0 使用種選擇性標記積累的自噬泡的新型染料測量自噬泡并監測溶酶體抑制的活細胞中的自噬通量。該染料已通過識別可滴定功能部分進行了優化，該部分允許對溶酶體進行小染色，同時在摻入自噬體、自噬體和自噬溶酶體（自噬溶酶體）時表現出明亮的熒光。該測定提供了種快速和定量的方法來監測活細胞中的自噬，而無需細胞轉染。

艾美捷 Enzo CYTO-ID ®自噬檢測試劑盒組分：

CYTO-ID ® Green Detection Reagent 2

Hoechst 33342 核染色

自噬誘導劑（雷帕霉素）

氯喹對照

10X 檢測緩沖液

艾美捷 Enzo CYTO-ID ®自噬檢測試劑盒特點：

1.沒有轉染試驗消除了轉染效率驗證的需要

2.更亮、更耐光的染料可特異性染色自噬囊泡

3.溶酶體的可忽略不計的染色降低了其他染料的背景

4.快速量化天然異質細胞群中的自噬

5.促進自噬激活劑和抑制劑的高通量篩選

艾美捷 Enzo CYTO-ID ®自噬檢測試劑盒作用機制：

該探針是種陽離子兩親示蹤劑 (CAT) 染料，它以與誘導磷脂沉積的藥物類似的方式快速分配到細胞中。仔細選擇染料上的可滴定功能部分可防止其在溶酶體內積聚，但可以標記與自噬途徑相關的液泡。

艾美捷 Enzo CYTO-ID ®自噬檢測試劑盒化學性質：

應用：流式細胞術、熒光顯微鏡、熒光檢測、HTS

質量控制：顯微鏡檢查：當 CYTO-ID® Green 自噬檢測試劑 2 摻入細胞中時，通常會在細胞核周區域的球形空泡中、在整個細胞質中分布的病灶中或在這兩個位置中觀察到這種熒光探針的積累，具體取決于根據正在研究的細胞類型。與按照用戶手冊所述制備的自噬樣品相比，未誘導的細胞顯示出非常低的背景染色。

數量：對于 -0200 尺寸：

200 次流式細胞儀檢測、250 次顯微鏡檢測或 3 x 96 孔微孔板檢測。

-0050 尺寸：

50 次流式細胞儀檢測、60 次顯微鏡檢測或 1 x 96 孔微孔板檢測。

使用/穩定性：通過適當的存儲，試劑盒組件自收到之日起可穩定使用年。

處理：避光。避免冷凍/解凍循環。

在藍冰上運送

短期儲存：-20°C

長期儲存：-80°C

圖：基于微孔板的 HepG2 細胞自噬分析。在 DMSO（對照）、0.5 µM 雷帕霉素 (Rap)、10 µM 氯喹 (CLQ) 或 0.5 µM Rap 和 10 µM CLQ 中培養 20 小時后，HepG2 細胞被 CYTO-ID® Green Detection Reagent 2 染色。細胞也用 Hoechst 33342 染色以進行細胞數標準化。用 CYTO-ID® Green Detection Reagent 2 測量，用雷帕霉素和氯喹處理的細胞自噬增加。

文獻參考：

1.Air Plasma-Activated Medium Evokes a Death-Associated Perinuclear Mitochondrial Clustering: M. Suzuki-Karasaki, et al.; Int. J. Mol. Sci. 23, 1124 (2022), Abstract;

2.Cellular Effects of Cyclodextrins: Studies on HeLa Cells: Á. Rusznyák, et al.; Molecules 27, 1589 (2022), Abstract;

3.CNS serotonin content mediating food deprivation-enhanced learning is regulated by hemolymph tryphan concentration ａnd auhagic flux in the pond snail: Y. Totani, et al.; Nutr. Neurosci. (2022), Abstract;

來源：https://www.amyjet.com/products/ENZ-KIT175-0050.shtml