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基因組 DNA 分離丨Worthington核糖核酸酶A
點擊次數:0發布時間:2022/7/28 15:12:55
更新日期:2022/7/28 15:12:55
所 在 地:中國大陸
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RNase 在反芻動物胰腺中的含量高(Barnard 1969)。結晶酶的主要成分是 RNase A;個次要成分是 RNase B。RNase B 是 RNase A 的糖基化形式(Beintema et al. 1976)。
艾美捷Worthington 核糖核酸酶A特異性:
RNase A 對嘧啶核苷鍵具有特異性(Volkin 和 Cohn 1953)。據信該反應分兩步進行。在步中,3',5'-磷酸二酯鍵被裂解,同時生成 2',3'-環狀磷酸二酯中間體。第二步,環狀磷酸二酯水解成3'-單磷酸基團。步對于底物的含氮堿基是非特異性的;然而,第二步對于末端為 2',3'-環狀磷酸的嘧啶核苷酸是特異的。RNase B 對環狀胞苷酸和酵母 RNA 具有與 RNase A 相同的特異性(Plummer 和 Hirs 1963)。RNase A 顯示出對較大底物的偏好(Nogués等, 1995)。
該酶在胞苷殘基處的裂解速度是尿苷殘基處的兩倍(Richards 和 Wyckoff 1971)。已發現 Thr45 通過與嘧啶堿基形成氫鍵和在空間上排除嘌呤堿基對介導嘧啶特異性重要(del Cardayré 和 Raines 1994)。Asp83 的側鏈對于穩定含尿苷底物裂解過程中的過渡態很重要;該殘留物對胞苷裂解的動力學沒有影響(del Cardayré 和 Raines 1995)。
艾美捷Worthington 核糖核酸酶A的7個應用:
1.DNA分離過程中的RNA去除
2.RNA序列分析
3.RNase 保護試驗
4.RNA定量或作圖
5.純化質粒 DNA
6.基因組 DNA 分離
7.分子量標記
艾美捷Worthington核糖核酸酶A參考文獻:
1.Admed, A., Schaffer, S., and Wetlaufer, D.: Nonenzymic Reactivation of Reduced Bovine Pancreatic Ribonuclease by Air Oxidation and by Glutathione Oxidoreduction Buffers , J Biol Chem 250, 8477, 1975
2.Ahmad, F.: Free Energy Changes in Denaturation of Ribonuclease A by Mixed Denaturants. Effects of Combinations of Guanidine Hydrochloride and One of the Denaturants Lithium Bromide, Lithium Chloride and Sodium Bromide , J Biol Chem 259, 4183, 1984
3.Ahmad, F.: Free Energy Changes in Ribonuclease A Denaturation. Effect of Urea, Guanidine Hydrocholoride and Lithium Salt, J Biol Chem 258, 11143, 1983
Worthington核心酶:包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。
Worthington主要研究覆蓋生物技術和生命科學研究,診斷,生物制藥和生物加工應用的高質量純化酶,蛋白質,核酸和試劑盒。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。