1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。

　　2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl， 然后再加待測樣品10µl(樣品*終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

　　4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

　　5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復 5 次，拍干。

　　6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。

　　7. 溫育：操作同 3。

　　8. 洗滌：操作同 5。

　　9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 15 分鐘.

　　10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(此時藍色立轉黃色)。

　　11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

　　人MMP-2檢測試劑盒操作注意事項

　　1. 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

　　2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

　　3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

　　4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

　　5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

　　6. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

　　7. 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

　　8. 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

　　MMP-2檢測試劑盒資料出處http://www.chem17.com/st277191