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技術文章
古朵詳述細胞培養中的無菌技術
點擊次數：959 發布時間：2016/10/28 9:57:34
詳述細胞培養中的無菌技術 上海古朵生物簡述：
1.實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。
2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在臺面的中央無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操作。
3.小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
4.工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作，并選擇適當等級的無菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中，應避免引起aerosol的產生，小心毒性，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭的傷害等。
5.定期檢測下列項目：
5.1.CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2.CO2培養箱的CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。
5.3.無菌操作臺內的airflow壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜，預濾網(300小時/預濾網，3000小時/HEPA)。
6.水槽可添加消毒劑(Zephrin1:750)，定期更換水槽的水。
原創作者：上海古朵生物科技有限公司
