兔膜聯蛋白A5(ANXA5) ELISA 試劑盒 

試劑盒組成

1. 酶標板：用于包被抗原和加入酶標抗體；

2. 酶標抗體：與待測血清中的、、、、結合；

3. 抗原：用于包被酶標板，與待測血清中的、、、、結合；

4. 陰性對照血清：用于設置陰性和陽性對照；

5. 陽性對照血清：用于設置陰性和陽性對照；

6. 洗滌液：用于清洗酶標板；

7. 底物：用于顯色反應；

8. 終止液：用于終止顯色反應。

操作步驟

1. 準備工作

（1）將試劑盒從冰箱中取出，放置至室溫；

（2）準備所需的試劑和樣品；

（3）將酶標板用洗滌液清洗干凈。

2. 包被抗原

（1）將抗原按照說明書要求稀釋后，加入酶標板孔中，每孔100μL；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使抗原充分覆蓋酶標板孔底部；

（3）將酶標板放入濕盒中，4℃孵育過夜。

3. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

4. 加樣和孵育

（1）在每個酶標板孔中加入100μL待測血清；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使血清充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育1小時。

5. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

6. 加酶標抗體

（1）在每個酶標板孔中加入100μL酶標抗體；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使酶標抗體充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育1小時。

7. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

8. 加底物顯色

（1）在每個酶標板孔中加入100μL底物溶液；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使底物溶液充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育15-30分鐘。

9. 終止反應并測量吸光度值

（1）在每個酶標板孔中加入50μL終止液；

（2）立即用酶標儀測量各孔的吸光度值。

計算

以標準物的濃度為橫坐標（對數坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

兔膜聯蛋白A5(ANXA5) ELISA 試劑盒

實驗注意事項

1. 保證試劑盒的質量：選擇正規廠家生產的試劑盒，確保試劑盒的質量和穩定性。

2. 嚴格控制實驗條件：實驗過程中要嚴格控制溫度、pH值、離子強度等條件，以保證實驗結果的準確性。

3. 避免交叉污染：實驗過程中要避免交叉污染，確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。

4. 標準化操作：實驗操作要標準化，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，避免人為誤差對實驗結果的影響。

5. 定期校準：定期對實驗儀器進行校準，確保儀器的準確性和穩定性。

6. 保存好實驗數據：實驗過程中要保存好實驗數據，以便后續分析和處理。

試劑盒性能：

1. 檢測范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：低檢測濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

合作單位:

中國醫科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫學院、中國農業大學

天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學、香港大學

云南省產品質量監督檢驗研究院

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