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兔果糖二磷酸醛縮酶C(ALDOC) ELISA 試劑盒
中文名稱 | ELISA試劑盒 |
規格 | 96T/48T |
樣本類型 | 血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液等 |
使用范圍 | 科研實驗,不得用于臨床診斷 |
反應時間 | 1-5h |
試劑盒保存 | 2-8℃ |
有效期 | 6個月 |
貨期 | 3-5天 |
試劑盒組成
1. 酶標板:用于包被抗原和加入酶標抗體;
2. 酶標抗體:與待測血清中的、、、、結合;
3. 抗原:用于包被酶標板,與待測血清中的、、、、結合;
4. 陰性對照血清:用于設置陰性和陽性對照;
5. 陽性對照血清:用于設置陰性和陽性對照;
6. 洗滌液:用于清洗酶標板;
7. 底物:用于顯色反應;
8. 終止液:用于終止顯色反應。
操作步驟
1. 準備工作
(1)將試劑盒從冰箱中取出,放置至室溫;
(2)準備所需的試劑和樣品;
(3)將酶標板用洗滌液清洗干凈。
2. 包被抗原
(1)將抗原按照說明書要求稀釋后,加入酶標板孔中,每孔100μL;
(2)將酶標板輕輕搖晃,使抗原充分覆蓋酶標板孔底部;
(3)將酶標板放入濕盒中,4℃孵育過夜。
3. 洗滌和干燥
(1)取出酶標板,用洗滌液清洗5次,每次清洗時間為1分鐘;
(2)用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。
4. 加樣和孵育
(1)在每個酶標板孔中加入100μL待測血清;
(2)將酶標板輕輕搖晃,使血清充分覆蓋抗原;
(3)將酶標板放入濕盒中,37℃孵育1小時。
5. 洗滌和干燥
(1)取出酶標板,用洗滌液清洗5次,每次清洗時間為1分鐘;
(2)用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。
6. 加酶標抗體
(1)在每個酶標板孔中加入100μL酶標抗體;
(2)將酶標板輕輕搖晃,使酶標抗體充分覆蓋抗原;
(3)將酶標板放入濕盒中,37℃孵育1小時。
7. 洗滌和干燥
(1)取出酶標板,用洗滌液清洗5次,每次清洗時間為1分鐘;
(2)用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。
8. 加底物顯色
(1)在每個酶標板孔中加入100μL底物溶液;
(2)將酶標板輕輕搖晃,使底物溶液充分覆蓋抗原;
(3)將酶標板放入濕盒中,37℃孵育15-30分鐘。
9. 終止反應并測量吸光度值
(1)在每個酶標板孔中加入50μL終止液;
(2)立即用酶標儀測量各孔的吸光度值。
計算
以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
兔果糖二磷酸醛縮酶C(ALDOC) ELISA 試劑盒
實驗注意事項
1. 保證試劑盒的質量:選擇正規廠家生產的試劑盒,確保試劑盒的質量和穩定性。
2. 嚴格控制實驗條件:實驗過程中要嚴格控制溫度、pH值、離子強度等條件,以保證實驗結果的準確性。
3. 避免交叉污染:實驗過程中要避免交叉污染,確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。
4. 標準化操作:實驗操作要標準化,嚴格按照試劑盒說明書進行操作,避免人為誤差對實驗結果的影響。
5. 定期校準:定期對實驗儀器進行校準,確保儀器的準確性和穩定性。
6. 保存好實驗數據:實驗過程中要保存好實驗數據,以便后續分析和處理。
試劑盒性能:
1. 檢測范圍:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 靈敏度:低檢測濃度小于0.78 nmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內變異系數小于10% ,板間變異系數小于15% 。
合作單位:
中國醫科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫學院、中國農業大學
天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學、香港大學
云南省產品質量監督檢驗研究院
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