兔C4結合蛋白(C4BP) ELISA 試劑盒 

一、實驗原理

 ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。

二、實驗材料

1. 兔C4結合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒
2. 酶標板、酶標板封口膜、封口機
3. 洗滌液、終止液
4. 人血清、血漿或組織勻漿樣本
5. 標準品
6. 實驗器具：吸管、酶標儀、移液器等
 

三、操作步驟

1. 準備工作：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘，使試劑盒恢復至室溫。同時準備好實驗所需的材料和器具。
2. 加樣：在酶標板的孔中加入標準品50μL，然后在后續的孔中依次加入待測樣本50μL。
3. 溫育：將酶標板密封，在37℃下溫育30分鐘。
4. 洗滌：用洗滌液清洗酶標板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內液體。
5. 加酶：在每個孔中加入酶標物100μL。
6. 溫育：再次將酶標板密封，在37℃下溫育30分鐘。
7. 洗滌：用洗滌液清洗酶標板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內液體。
8. 加底物：在每個孔中加入底物A液50μL，再加入底物B液50μL。
9. 終止反應：在每個孔中加入終止液50μL。
10. 檢測：用酶標儀在450nm波長下讀取各孔的吸光度（OD值）。

四、結果分析

根據標準品和樣本的OD值，繪制標準曲線，從而計算出樣本中兔C4結合蛋白(C4BP)的濃度。具體分析方法可參考試劑盒說明書或相關文獻。

五、注意事項

1. 在操作過程中，應保持酶標板的干燥，避免水分進入孔內。
2. 加樣時需確保加樣準確、無氣泡產生。
3. 溫育和洗滌過程中需嚴格控制時間和溫度，確保實驗結果的準確性。
4. 在使用酶標儀讀取OD值時，需確保波長設置正確，避免誤差產生。
5. 在整個實驗過程中，需保持操作環境的清潔和整潔，避免交叉污染。
 

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