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人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78)酶聯免疫試劑盒
點擊次數:39發布時間:2016/3/10 16:47:06

更新日期:2016/3/10 16:47:06
所 在 地:中國大陸
產品型號:
優質供應
詳細內容
檢測準備工作:
1. 請提20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結
晶,屬于正,F象,可用40℃水浴微加熱使結晶完全溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超
過50℃,使用時洗滌液應為室溫)。當日使用。
3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘,加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中,旋緊管蓋,
靜置10分鐘,上下顛倒數次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為2000pg/mL)。
然后根據需要進行倍比稀釋(注:不要直接在反應孔中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃
度:2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、0pg/mL,標準品&樣品稀釋液直接作為空
白孔0pg/mL。如配制1000pg/mL標準品:取0.5mL2000pg/mL的上述標準品加入含有0.5mL標
準品&樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度依此類推。
人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78)酶聯免疫試劑盒
計算:
人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78)酶聯免疫試劑盒
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。
2.批內與批見應分別小于9%和15%
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78)酶聯免疫試劑盒
操作步驟:
實驗開始,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕藴势&樣品稀釋液 100μL,余孔分
別加標準品或待測樣品 100μL,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸
及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育 90 分鐘。為保證實驗結果有效性,每次
實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每個孔中加入生物素化抗體工作液 100μL(在使用 15 分鐘
內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育 1 小時。
3. 棄去孔內液體,甩干,洗板 3 次,每次浸泡 1-2 分鐘,大約 350μL/每孔,甩干并在吸水紙
上輕拍將孔內液體拍干。
4. 每孔加酶結合物工作液(臨用 15 分鐘內配制)100μL,加上覆膜,37℃溫育 30 分鐘。
5. 棄去孔內液體,甩干,洗板 5 次,方法同步驟 3。
6. 每孔加底物溶液(TMB)90μL,酶標板加上覆膜 37℃避光孵育 15 分鐘左右(根據實際顯色情
6th Edition, revised in June, 2014
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況酌情縮短或延長,但不可超過 30 分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
7. 每孔加終止液 50μL,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物溶液
的加入順序相同。
8. 立即用酶標儀在 450nm 波長測量各孔的光密度(OD 值)。應提打開酶標儀電源,預熱儀
器,設置好檢測程序。
9. 實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存
人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78)酶聯免疫試劑盒
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