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              人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯免疫試劑盒

              點擊次數:52發布時間:2016/3/9 13:58:01

              人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯免疫試劑盒

              更新日期:2016/3/9 13:58:01

              所 在 地:中國大陸

              產品型號:96T/48T

              簡單介紹:公司名:上海篤瑪生物科技有限公司地址:上海交貨方式:快遞上門產品:人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯免疫試劑盒型號:DM00822英文名稱:Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit

              優質供應

              詳細內容

               篤瑪生物關于試劑盒的優勢:

               

              1.高效,靈敏,特異的抗體

              2.穩定的重復性和可靠性

              3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高和固相載體

              4.適用血清,血漿,組織勻漿液,細胞培養上清液,尿液等多種標本類型



              樣品類型(SAMPLE TYPES):
              標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材須向銷售人員索要說明書。

              樣品采集:收集標本必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

              人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)ELISA檢測試劑盒提供免費檢測服務,7個工作日內出實驗報告,保質保量完成委托實驗,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。


              操作步驟
              實驗開始,請提配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
              1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
              為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
              2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用一小時內配制),37℃,60分鐘。
              3.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
              4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
              5.溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
              6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
              7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
              8.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
              注:
              1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
              2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
              3. 為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
              4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
              5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。

              洗板方法
              手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。
              自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
              計算
              以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
              注意事項
              1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
              2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
              3. 一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
              4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。
              5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
              6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
              7. 底物請避光保存。
              8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。


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              聯系人:楊燕燕

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