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上海篤瑪生物科技有限公司人胚腎細胞供應原代培養及其操作步驟:原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環境,在無菌、適當溫度和一定的營養條件下,生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養做各種實驗,如藥物測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。
產品名稱:人胚腎細胞
其操作人胚腎細胞步驟如下。
產品名稱:人胚腎細胞
產品用途:科研
保證運輸中細胞的正常生長,關于其價格、報價、貨期,請咨詢我們。
產品特點:活性好、存活率高、實驗成果特征明顯
產品來源:人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動物組織
產品運輸:免費快遞
產品包裝:瓶裝
產品用途:細胞培養研究
其操作人胚腎細胞步驟如下。
1.剪切組織 先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養所需組織。再次清洗后,用手術刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當的緩沖液再清洗一次。
2.消化分離 消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞,以利于進一步的培養,常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3.培養 細胞懸液用計數板進行細胞計數。用培養液將細胞數調整為(2~5)×105 cells/ml,或實驗所需密度,分裝于培養瓶中,使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養瓶底部為宜。置CO2培養箱內,5%CO2,37℃靜置培養。一般3~5d,原代培養細胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長,可補加原培養液量1/2的新培養液,繼續培養2~3d后換液,一般7~14d可以長滿瓶壁,進行傳代。
4.注意事項
(1)無菌操作:細菌或霉菌污染是培養失敗的常見原因,必須加強各個環節的無菌操作觀念,以預防為主,一旦污染,一般很難消除。
(2)培養液:所用的培養液必須滿足細胞生存和生長的必要條件。由于細胞來源的動物種類、組織類型不同,對培養液的要求有一定的差異,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
(3)小牛血清:小牛血清對于維持培養細胞的生存和促進細胞增殖起著關鍵性作用?蛇x擇多種不同批號的小牛血清進行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號小牛血清后,就保持應用至實驗完成。
(4)膠原酶溶液:必須新鮮配制,貯存時間過長(即使是-20℃低溫保存),也將影響消化效力,導致消化時間過長,細胞損傷增加。
(5)L-谷氨酰胺:幾乎所有細胞對谷氨酰胺都有較高的要求,細胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白質,在缺少谷氨酰胺時,細胞會因生長不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不穩定,加有谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱貯存兩周以上時,就應重新加入原來量的谷氨酰胺。
(6)靜置培養:原代細胞在消化分離后,置于CO2培養箱的頭24~48h (必要時72h)內,應處于絕對靜置狀態,切忌不時地取出培養瓶觀察生長狀況,這將使原代分離細胞難以貼壁,更談不上伸展和增殖,初學者尤應注意。不必擔心培養液中的營養成分會消耗光,在細胞增殖之前對營養的要求并不大。原代培養初期僅加一薄層培養液的目的也在于有利于細胞貼壁伸展。
(7)消化時間:一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可,因為此時組織顆粒已經松散,略經吹打即成細胞團或單個細胞,過久的消化往往導致細胞損傷加重,細胞培養成活率降低。 (8)其他生長因子:經過以上處理,一般原代分離細胞培養均可以成功。對于少數特殊類型細胞也可以考慮加一些特殊的生長因子,如胰島素能促使細胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外,內毒素、EGF、FGF等均有促有絲分裂作用,但費用較高。
人人腎透明細胞腺癌細胞
人人高轉移肺癌細胞
人人卵巢癌細胞A2780
人人T淋巴細胞白血病細胞
人人惡性黑色素瘤細胞
人表皮癌細胞(A431)
人人肺癌細胞
人人橫紋肌瘤細胞
小鼠小鼠皮下結締組織細胞
人人胚腎細胞
人人涎腺腺樣囊性癌細胞
人人涎腺腺樣囊性癌細胞
人人誕腺癌細胞系(Acc-M)
人人腎癌細胞系(ACHN)
人人胃腺癌細胞
人人子宮內膜腺癌細胞(AN3 CA)
小鼠小鼠巨噬細胞
人人卵巢癌細胞系(Anglne)
胰腺細胞AR42J
人人轉移胰腺腺癌細胞
小鼠小鼠黑色素瘤細胞
鼠雜交瘤細胞(B6YH4)枝原體陽性
鼠鼠細胞系(B82)
美洲絨猴絨猴EBV轉化的白細胞
小鼠小鼠胚胎成纖維細胞
人人乳腺癌細胞Bcap-37
人人肝癌細胞系(Bel-7402)
人人肝癌細胞
人人肝癌細胞
人人絨毛膜腫瘤細胞系(Bewo)
人人胃腺癌細胞(低分化)
鼠敘利亞倉鼠腎細胞系(BHK-21)
人膀胱癌細胞(BI U-87)
大鼠Buffalo大鼠肝細胞
猴猴腎細胞系(BSC-1)
人人胃癌BSG823
人人乳腺導管癌細胞
人人乳腺管癌細胞
人人原位胰腺腺癌細胞
小鼠小鼠乳腺腫瘤細胞
小鼠小鼠成肌細胞C2C12
人人子宮癌細胞C-33A
小鼠小鼠胚胎成纖維細胞
大鼠大鼠膠質瘤細胞
蚊子蚊子細胞(C6/36)
鼠鼠小腦細胞C8-D1A
人人宮頸癌腸轉移細胞
人Burkitts淋巴瘤細胞系(CA46)
人人結腸腺癌細胞
人人食管癌細胞CaES-17
人人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞
人人肺腺癌 (胸水)
人人退行性癌細胞
人人乳突狀卵巢腺癌細胞(Caov-3)
人人宮頸上皮細胞癌(Caski)
大鼠大鼠肝癌細胞
人人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞
人人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞
人人胰腺癌細胞
人人EB病毒轉化的B細胞
人人張氏肝細胞
中國倉鼠倉鼠肺細胞
人人肥大細胞白血病細胞CHMAS
中國倉鼠倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷
中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株
鮭魚鮭魚胚胎細胞CHSE
魚草魚腎臟細胞(CIK)
人人鼻咽癌細胞CNE(低分化)
人鼻咽癌細胞CNE2
人人卵巢癌細胞系(CoC1)
人CoC1細胞耐藥亞株(CoC1/DDP)
人人結腸癌細胞
人人結腸腺癌細胞
非洲綠猴非洲綠猴SV40轉化的腎細胞
非洲綠猴非洲綠猴SV40轉化的腎細胞
貓貓腎細胞
中國倉鼠中國倉鼠卵巢細胞
非洲綠猴非洲綠猴腎細胞
人人結腸腺癌細胞
人人巨核細胞白血病細胞
人人成巨核細胞白血病細胞
人人結直腸腺癌上皮細胞
人人小細胞肺癌DMS153
雞雞淋巴瘤細胞
人人前列腺癌細胞
鼠鼠腹水瘤(EAC-E2G8)
牛牛胚氣管細胞
人人食道癌細胞Eca-109
人人臍靜脈內皮細胞系(ECV-304)(具有T24細胞特性)
小鼠小鼠淋巴瘤(EL-4)
鯉魚鯉魚上皮細胞EPC
人人卵巢透明細胞癌
人人腺癌細胞系(F56)
貓貓腎細胞
小鼠小鼠畸胎瘤細胞
人人咽鱗癌細胞
牙鲆細胞FG
人人肝細胞FL62891
小鼠小鼠骨髓瘤細胞
猴恒河猴胚腎細胞(FRhK-4)
魚草魚腎細胞系(GIK)
人上頜牙齦癌頸淋巴結轉移癌GNM
鼠鼠成纖維細胞系(GR)
鼠BALB/C小鼠肝癌細胞系(H22)
鼠鼠肝癌細胞(H22-H8D8)
人人表皮肺癌細胞H292
人人腦神經膠質瘤細胞(H4)
鼠大鼠肝癌細胞系H4-ⅡE
人人T淋巴細胞系(H9)
大鼠大鼠心肌細胞
人人羊膜細胞
人人永生化表皮細胞(HaCAT)
人人口腔癌細胞HB
人人乳腺細胞HBL-100
大鼠大鼠腎小球系膜細胞EC (HBZY-1)
人人子宮鱗癌細胞(高分化)
人人乳腺癌細胞
人人膽管細胞型肝癌細胞
人人盲腸腺癌細胞(未分化)
人人結腸癌細胞
人人結直腸腺癌細胞
人人盲腸腺癌細胞HCT-8
人人子宮內膜腺癌細胞
人人子宮內膜腺癌細胞
人人二倍體細胞系(HEL)
人人宮頸癌細胞系(Hela)
人人宮頸癌細胞
人宮頸癌細胞HeLa-S3
人人肝癌細胞
人人肝癌細胞
人人喉表皮樣癌細胞
人人喉癌細胞系(Hep-2)
人人肝癌細胞系(Hep-3B)
小鼠小鼠肝癌細胞
人 表達HBV病毒的人肝細胞HepG2.2.15
人人胚肺成纖維細胞
人人胃癌細胞(未分化)
人人小腸癌細胞系(HIC)
人腎小管上皮細胞株HK-2
人人二倍體細胞系(HL)
人早幼粒急性白血病細胞系(HL-60)
人人肝正常細胞HL-7702
人人B淋巴母細胞
人人卵巢癌細胞HO-8910
人人正常乳腺細胞
人人乳腺癌細胞
人男性正常龜頭細胞系HS68