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豚鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
豚鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的操作步驟如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。2.洗滌:棄包被液(拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。3.封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。4.洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。5.結合一抗:用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢,每孔100μl,要設立陰性對照,37℃孵育1.5h。6.洗滌:同上。7.結合酶標二抗:每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀釋倍數根據產品不同有所不同,可按說明書進行)50μl,37℃孵育1h.8.洗滌:同上。9.顯色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室溫避光顯色10min。10.待顯色后,每孔加入50μl終止液(2mol/L H2SO4)終止反應。使用酶標儀讀取450nm的OD值,以確定水平。以上步驟僅供參考,具體操作請根據實際情況和產品說明書進行。
試劑盒性能
1. 特高:由于是抗原的特結合,因此試驗的特很高,能夠排除其他的。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大,能夠檢測出微量的抗原或。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易,適合于大規模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。
樣品收集、處理及保存
1. :使用不含熱原和內的試管,操作中避免任何細胞,收集血液后,3000 轉離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
酶免ELISA試劑盒是一種常用的學實驗技術,常用于抗原或的定量檢測。這種試劑盒利用酶聯吸附法(ELISA)技術,將已知的抗原或吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優點,在醫學、生物學和化學等域廣泛應用。
豚鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
酶免ELISA試劑盒是一種常用的學實驗技術,常用于抗原或的定量檢測。這種試劑盒利用酶聯吸附法(ELISA)技術,將已知的抗原或吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優點,在醫學、生物學和化學等域廣泛應用。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。
2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素),非特蛋
白質結合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。
4)洗滌:去除未結合的。
5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。
6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產生顏色變化。
8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數:使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或的濃度成正比。
標本的采集及保存
1.:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。 (注:標本溶血會影響**檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。)
結果分析
根據試劑盒提供的品濃度及對應的OD值,利用品繪制的曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數據處理,通過計算待測樣品的濃度。
免責聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔, 本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
原創作者:上海篤瑪生物科技有限公司