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              雞RhoGDP解離因子α(ARHGDIα)ELISA試劑盒

              點擊次數:13 發布時間:2024/1/18 9:54:00
                                                

               

              雞RhoGDP解離因子α(ARHGDIα)ELISA試劑盒

              實驗原理

               

                  ELISA運用了學原理和化學反應顯色原理,需要將抗原或預包被在固相載體表面,使后來形成的抗原--酶 (熒光基團) -底物復合物黏附在載體上,通過檢測OD值或發光值,來檢測靶蛋白的含量。

               

               

              ELISA試劑盒的實驗原理.ELISA試劑盒的實驗原理是建立在抗原與學反應的基礎上的,同時結合了酶的催化作用。其基本原理包括三個方面:1.抗原或能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學活性。2.抗原或可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其學和酶學活性。3.酶結合物與相應抗原或結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。ELISA法一方面是建立在抗原與學反應的基礎上,因而具有特。而另一方面又由于酶標記抗原或是酶分子與抗原或分子的結合物,它可以催化底物分子發生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的性。因此,ELISA法是一種既又特異的。

              酶聯吸附法(ELISA)的優點包括:1.高靈敏度:ELISA可以檢測出微量的抗原或,其靈敏度通常比其他學更高。2.高特:ELISA僅與特定的抗原或結合,因此不易受到其他的,具有較高的特。3.快速:ELISA操作簡便、快速,可以在短時間內結果.4.易操作:ELISA實驗操作相對簡單,易于化和自動化,因此適合于大規模樣品的檢測。5.應用范圍廣:ELISA可以用于檢測多種生物分子,如蛋白質、多肽、等,因此在醫學、生物域廣泛應用。6.無放射性核素污染:與放射測定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更為安全、環保?傊,ELISA是一種高靈敏度、高特、快速、易操作的學技術,具有廣泛的應用景。

               

               

               

               

              酶免ELISA試劑盒是一種常用的學實驗技術,常用于抗原或的定量檢測。這種試劑盒利用酶聯吸附法(ELISA)技術,將已知的抗原或吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優點,在醫學、生物學和化學等域廣泛應用。

              ELISA試劑盒的用法包括以下步驟:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。2.洗滌:棄包被液(拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。3.封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。4.洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。5.加樣:加入已經稀釋好的樣品,37℃反應1h。一般樣本加入50-100μl,充分混勻。6.洗滌:用洗滌液洗板3次,每次3min~5min。7.加入酶標試劑:每孔加入100μl酶標溶液,37℃,1h。8.洗滌:用洗滌液洗板3次,每次3min~5min。9.顯色:每孔先加入顯色劑A液50μl,再加入顯色劑B液50μl,37℃避光10-15min。10.終止及測定:加入50μl終止液,終止反應,用酶標儀在450nm波長處測OD值。

               操作步驟

               

              1. 工作:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘,使試劑盒恢復至室溫。同時好實驗所需的材料和。2. 加樣:在酶標板的弟1個孔中加入品50μL,然后在后續的孔中依次加入待測樣本50μL。3. 溫育:將酶標板密封,在37℃下溫育30分鐘。4. 洗滌:用洗滌液清洗酶標板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內。5. 加酶:在每個孔中加入酶標物100μL。6. 溫育:再次將酶標板密封,在37℃下溫育30分鐘。7. 洗滌:用洗滌液清洗酶標板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內。8. 加底物:在每個孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 終止反應:在每個孔中加入終止液50μL。10. 檢測:用酶標儀在450nm波長下讀取各孔的吸光度(OD值)。

              雞RhoGDP解離因子α(ARHGDIα)ELISA試劑盒

              結果分析

              根據品和樣本的OD值,繪制曲線,從而計算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析可參劑盒說明書或相關文獻。

               

              注意事項

              1. 在操作中,應保持酶標板的干燥,避免水分進入孔內。2. 加樣時需確保加樣準確、無氣泡產生。3. 溫育和洗滌中需嚴格控制時間和溫度,確保實驗結果的準確性。4. 在使用酶標儀讀取OD值時,需確保波長設置正確,避免誤差產生。5. 在整個實驗中,需保持操作的清潔和整潔,避免交叉污染。

               

              原創作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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